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组织甘油检测试剂盒

组织甘油检测试剂盒

产品时间:2019-01-16

简要描述:

组织甘油检测试剂盒;甘油三酯是由甘油和脂肪酸酯化而成,是血脂的主要成分,也是机体重要的供能物质。高甘油三酯和高胆固醇血症是临床常见的高脂血症,与许多疾病相关。与血浆甘油三酯测定相比,实体组织和细胞的甘油三酯测定并非易事。

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组织甘油检测试剂盒

 

描述:甘油三酯是由甘油和脂肪酸酯化而成,是血脂的主要成分,也是机体重要的供能物质。高甘油三酯和高胆固醇血症是临床常见的高脂血症,与许多疾病相关。与血浆甘油三酯测定相比,实体组织和细胞的甘油三酯测定并非易事。本试剂盒避免了有毒的lv仿甲醇提取、繁杂的氮气吹干和脂质复溶等步骤,采用高效能试剂进行组织细胞裂解和甘油三酯抽提,而且优化了GPO Trinder酶学反应组分和操作步骤。简单易行、灵敏度高检测范围为 20-2000µmol/L。可用于精确测量动植物组织细胞、固态食品材料、高浓度油料样品中的甘油三酯含量。

原理

(1)脂肪酶分解血清中的甘油三酯为甘油;

(2)甘油激酶将甘油磷酸化为3-磷酸甘油;

(3)3-磷酸甘油被甘油磷酸氧化酶氧化产生过氧化氢;在过氧化物酶作用下生色底物转化为苯醌亚胺,其光密度值与甘油浓度成正比。

 

适用范围:适用于动物实体组织、培养细胞、油料植物组织、固态食品组织、高浓度油料样品中甘油三酯含量的测定。

 

操作步骤:

一 组织细胞裂解:

   在裂解前,组织或者细胞用PBS洗涤两次以去除甘油
1. 原代脂肪细胞:200g,5分钟离心收集细胞。建议每100 µl压积(Packed Cell Volume)脂肪细胞加入1ml裂解液,震荡裂解,而后室温静置10分钟。
2. 分化脂肪细胞或非脂肪细胞:可先用胰酶消化、离心收集细胞而后进行裂解,也可直接在培养皿内进行裂解。通常情况下,可按比例每1x106 个细胞加入0.1ml裂解液,混匀后室温静置10分钟。
3. 动物组织:离心管精确称重,加入组织块后再称重,二者相减(即减量称重法)计算组织重量(约50mg)。强烈建议按比例每1mg组织加20µl裂解液以减少样品间蛋白和脂质含量变异而产生的误差。强烈建议裂解液用量在1ml左右,保证有效的匀浆裂解与脂质提取。用电动高速匀浆器或手动玻璃匀浆器破碎组织。(不推荐超声方法,因其不能完全和均匀破碎。应根据预实验调整初始的组织细胞加入量),匀浆后静置10分钟。
4. 植物油料种子、食品、含高油量样品:用减量称重法对样品进行精确称重,建议按比例每1mg组织加20µl裂解液以减少样品间蛋白和脂质含量变异而产生的误差。加入裂解液后可用研钵对样品进行研磨,而后将研磨液转移到新的离心管中,室温静置10分钟。

 

组织甘油检测试剂盒

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