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DNS试剂(Ghose法)

DNS试剂(Ghose法)

产品时间:2023-12-21

简要描述:

DNS试剂(Ghose法) :Ghose法DNS试剂。又称3,5-二硝基水杨酸法或简称DNS法,DNS试剂是植物总糖和还原糖检测(硝基水杨酸法)的成分之一,定量检测植物组织样品中的总糖和还原糖的含量。
检测原理是还原糖在碱性条件下被氧化成糖酸,3,5-二硝基水杨酸被还原为棕红色的氨基化合物。在一定范围内,还原糖的量与棕红色产物的颜色深浅程度呈一定比例关系。

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DNS试剂(Ghose法) :

【产品规格】:500ml                         

【储存条件】:2-8℃

【有效期】:12个月

产品简介:

GhoseDNS试剂。又称3,5-二硝基水杨酸法或简称DNS,DNS试剂是植物总糖和还原糖检测(硝基水杨酸法)的成分之一,定量检测植物组织样品中的总糖和还原糖的含量。

检测原理是还原糖在碱性条件下被氧化成糖酸,3,5-二硝基水杨酸被还原为棕红色的氨基化合物。在一定范围内,还原糖的量与棕红色产物的颜色深浅程度呈一定比例关系。在540nm处测定棕红色物质的吸光度,该吸光度值与还原糖含量呈线性关系。


操作步骤(仅供参考)

1、 还原糖的提取:

①称取植物样品0.5~3g,剪碎,加入蒸馏水约3ml匀浆,转移至烧杯或三角瓶中,用12ml蒸馏水冲洗研磨器2~3次,洗出液也转移至该容器。

50℃水浴30min,并不时搅拌,以便还原糖彻底浸出。

③将沉淀和浸出液转移至50ml离心管,4000g离心5min

④留取上清液,向沉淀中加入20ml蒸馏水,混匀,再次4000g离心5min

⑤留取上清液,将2次获得的上清液合并,用蒸馏水定容至100ml(提取液),混匀,作为还原糖待测液。

2、 总糖的水解和提取:

①称取植物样品0.5~3g,剪碎,加入蒸馏水约3ml匀浆,转移至烧杯或三角瓶中,用12ml蒸馏水冲洗研磨器2~3次,洗出液也转移至该容器。

②向容器中加入10ml 6M盐酸溶液,搅拌均匀,煮沸30min,并不时搅拌。

③取2滴滴加于载玻片上,滴加1滴显色液,检查水解是否完全,如已经水解完全则不显示蓝色。

④水解完毕后,冷却至室温,加入6M氢氧化钠溶液,使溶液pH7.4左右,用蒸馏水定容至100ml,混匀,4000g离心5min或过滤,获得上清或滤液。

⑤取上清或滤液10ml,用蒸馏水定容至100ml,成稀释10倍的总糖水解液(提取液),取1ml总糖水解液,测定其还原糖的含量。


注意事项:

1、 该试剂避免反复冻融,以免失效或效率下降,尽量避光保存。

2、 稀释盐酸和氢氧化钠溶液时,应小心操作,避免伤人。

3、 一般市售的浓盐酸摩尔数约为11.6M,应稀释至6M后使用。

4、 待测样本如不能及时测定,应置于2~8℃保存,3天内稳定。

5、 如果样品还原糖浓度过高,应用蒸馏水稀释后重测,结果乘以稀释倍数。

6、 总糖计算公式在测定干扰杂质很少、还原糖含量相对总糖含量很少时使用,×0.9是为      了从测定出的总糖水解成单糖中,扣除水解时所消耗的水量。


DNS试剂(Ghose法) 


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