RNAwait非冻型组织RNA保存液操作指南

RNAwait是一种液态的，无毒的组织RNA保存试剂，能迅速渗入组织抑制RNAase，稳定并保护组织样品中的RNA。本产品应用范围广，适用于多种动物组织（如肝脏、脑、肺、脾脏、肾脏、肌肉组织等），还可用于酵母、细菌、真菌、细胞以及某些植物样品的RNA保存。经RNAwait浸润的组织或细胞，可在37℃保存1天，室温保存1周，4℃保存4周，-20℃/-80℃长期保存。本产品几乎兼容所有的RNA分离方法，如Trizol法、离心柱法和磁珠纯化法等。

操作指南

1. 样品处理

1) 动物组织样品：将组织剪切成长宽高均不大于0.5厘米的组织块，迅速加入5-10倍体积的RNAwait。注意如骨头等液体渗透性较弱的组织，不适合用本品进行RNA保护。

2) 细胞样品：收集细胞沉淀，用PBS洗涤后，5000g离心1-2分钟，吸除PBS后小心加入5-10倍体积的RNAwait，避免吹起细胞。

3) 细菌样品：12000g离心2min，弃上清加入5-10倍体积RNAwait试剂，对酵母和真菌样品进行保存时，请参考细菌处理方法。

2. 样品保存

1) 浸透于RNAwait试剂中的样品在37℃可保存一天，室温保存一周，4℃保存一个月。

2) -20℃保存方法：样本4℃浸透过夜，然后转移至-20℃长期保存，RNAwait试剂不会在-20℃冻结，但有可能出现结晶。可直接放在室温融化，不会影响RNA的提取量和完整性。

3) -80℃保存方法：样本4℃浸透过夜，然后转移至-80℃长期保存（建议样品在转移至-80℃前将其从RNAwait中取出，直接冻于-80℃保存）。样本可直接放在室温融化，再重新冻上，不会影响RNA的提取量和完整性。

3. RNA提取

4) 组织样品：用干净的镊子从RNAwait中取出组织块，吸水纸吸掉表面液体，之后立即置于裂解液中匀浆或液氮中研磨。

5) 细胞和细菌等样品：加入与RNAwait等体积的DEPC处理水，10000g离心1min收集样品，小心去除上清，后续即可用各种方法提取RNA。酵母和真菌参考本方法提取RNA。

注意事项

1、本产品除保护RNA外，也可保护样品中的DNA和蛋白质的，但会导致蛋白质变性，不适用于天然蛋白质的提取。

2、本产品仅适用于新鲜组织样品或细胞样品。不可用于冰冻组织或细胞。

3、经本产品保存的样品，会变得微硬，为正常现象。

4、本产品存放过程中可能会出现沉淀，使用前放到37℃水浴中加热，沉淀溶解后不影响使用。

5、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。