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液体样本甘油测定试剂盒
更新时间:2022-10-20   点击次数:270次

液体样本甘油测定试剂盒检测原理


描述:甘油是甘油三酯的水解产物。脂蛋白酯酶能水解血液中的甘油三酯;胰脂酶可以水解食 物中的甘油三酯;激素敏感脂肪分解酶能水解脂肪细胞中的甘油三酯。与游离脂肪酸一样,甘 油含量是甘油三酯水解反应的可靠检测指标,但检测更方便。本试剂盒采用甘油磷酸氧化酶法 和经典 GPO-Trinder 酶学反应相结合的方法,通过比色法测定液体样本中的甘油含量。经过优 化后,操作步骤更加简单,检测线性范围在 10-1200μmol/L,可靠性和重复性俱佳,适合生物 医学、食品实验室检测。



操作步骤:

一. 样本处理: 酒类、饮品、清澈液体样本:可直接进行测定,如超过线性范围可用蒸馏水或生理盐水稀释后 再测定。 培养液:取不含酚红、无颜色、无血清的细胞培养基,如有细胞碎片应 4ºC,,12,000g 离心 5min, 取上清进行测定。 血液:新鲜抗凝血,4ºC,2,000g 离心 5min 得到血浆;非抗凝血,先 4ºC 静置 2h 得到血清后, 2000g 离心 10min,除去血细胞。将得到的血浆/血清 70ºC 加热 10 分钟灭活內源脂肪酶,12,000g 离心 10min ,取上清测定或-20ºC 保存。 二 .工作溶液配制:按 4:1 比例,取 4 ml 试剂 R1 与 1 ml 试剂 R2 混合,立即使用或 4ºC 保存 <1 天,变色弃去。 三 .标准品稀释:用蒸馏水、生理盐水或与样品缓冲液一致的液体,将 4 mM 甘油标准品倍比稀 释为 1000、500、250、125、62.5、31.25、15.625、7.8125 μmol/L,通常取其中 4~6 管即可, 注意设置 0 浓度对照反应管。


原理:在 ATP 存在下甘油被甘油激酶磷酸化为 3-磷酸甘油,再被甘油磷酸氧化酶氧化产生过氧 化氢;在过氧化物酶作用下生色底物转化为苯醌亚胺,其光密度值与甘油浓度成正比。


液体样本甘油测定试剂盒检测原理

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