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液体样本总蛋白提取试剂盒简便,效率高
更新时间:2023-01-06   点击次数:278次

液体样本总蛋白提取试剂盒简便,效率高


描述:

本试剂盒能够在15分钟内对液体样品中的蛋白进行提取浓缩,或脱盐、脱去垢剂、脱还原剂等。适用于各种液体样品(10µL~1L),如蛋白溶液、胞浆胞核蛋白提取液、细胞或微生物培养基上清液、血液、尿液、脑脊液等各种体液;也适于从细胞悬液提取总蛋白。蛋白回收率95-100%,远高于经典的丙酮或三氯醋酸沉淀法,且可有效去除样品中的脂质,不影响后续SDS-PAGE和Western Blot等生物实验。可用1.5ml离心管微量提取也可大规模制备,简便高效。


组成和保存:

浓缩试剂50ml,适用100x 100ml次浓缩提取。4℃保存 12个月有效


适用样品:

1. 液体样品如蛋白溶液、胞浆胞核蛋白提取液、细胞或微生物培养基上清液、血液、尿液、脑脊液等各种体液。2. 原代或传代细胞悬液,可按液体方式提取总蛋白。


注意

1. 可室温操作。1 mg/ml总蛋白可被有效沉淀,更低浓度的蛋白可加入白蛋白做载体帮助沉淀。可有效去除液体样品中的盐(1M)、还原剂(1%巯基乙醇


或DTT)、去垢剂(5%SDS、1% Triton X-100、1% NP-40、油脂等。如果上述成分浓度过高,用水稀释后进行提取。干燥蛋白沉淀可4℃或-20℃长期保


存。


2. 血浆蛋白或疏水蛋白溶解较慢,反复数次95℃煮并加以-20℃冻融可助溶。必要时4℃溶解过夜,或用2% SDS溶解沉淀,95℃煮,然后离心去除不


溶解物。


3. 如定量蛋白应使用不含溴酚蓝的凝胶上样缓冲液溶解沉淀,蛋白定量后再加入溴酚蓝。


4. 提取培养细胞总蛋白:用蒸馏水或1% SDS制备一定体积的细胞悬液,振荡裂解细胞,然后执行上述液体样品蛋白提取程序。


5. 实体组织的蛋白提取可使用P1250实体组织和细胞蛋白抽提试剂盒。


6. 提取试剂有刺激性,一旦接触立即用水清洗。


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