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Swe重组胰酶细胞消化液使用方法
更新时间:2023-05-24   点击次数:296次

Swe重组胰酶细胞消化液使用方法产品描述


胰蛋白酶(Trypsin)简称胰酶,是一种丝氨酸水解酶,能把多肽链中赖氨酸和精氨酸中的羧基端切断。在组织细胞的提取、培养,以及体外细胞培养过程中,均会使用到胰蛋白酶消化液,用于水解细胞间蛋白质,使组织或细胞离散成单个细胞。传统胰蛋白酶取自猪、牛等动物胰脏。传统胰酶的来源和生产工艺特性,决定了其不可避免的会含有动物源杂质以及潜在病毒污染。本产品使用重组猪胰蛋白酶替代传统胰蛋白酶。在生产制备过程中不使用任何动物源性原料,且通过多轮纯化,确保重组猪胰蛋白酶纯度以及活率。使其不仅可以替代传统胰酶的功能,而且可用于严格要求使用无动物源性的特殊细胞或组织的消化。此外本产品含EDTA和酚红指示剂。


储存与运输

冰袋运输;4℃避光保存,12个月有效;短期不使用情况下,建议-20℃保存,可保存更长时间。


操作步骤

注意:以下方案主要用于贴壁细胞。对于组织消化,需要先将组织剪碎成合适大小。不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。

1. 去除细胞原培养液,使用PBS、不含血清培养液或其他缓冲液洗涤细胞1-2次以去除残余血清;

2. 加入适量重组胰蛋白酶消化液覆盖细胞,于显微镜下进行消化观察,大多数细胞消化时间在30s-3min之间;对于难消化细胞,可放入细胞培养箱中孵育消化一定时间( 消化时间仅供参考,具体消化时间需根据实际情况而定);

3. 当细胞出现明显收缩或形态变化时,吸除重组胰蛋白酶消化液,加入适量含血清的细胞培养液终止消化(如果用移液枪轻轻吹打时很难使细胞从板底脱落,表明消化时间不够,可加入胰酶细胞消化液重新消化。切忌避免过度消化);

4. 细胞悬液收集置离心管,以800-1200 rpm/min 离心3-5 min,加入适量含血清的细胞培养液(可选);

5. 轻轻吹打细胞,制成细胞悬液,即可传代培养或后续实验。



 


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