技术文章您的位置:网站首页 >技术文章 > 人血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)elisa试剂盒实验条件选择
人血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)elisa试剂盒实验条件选择
更新时间:2023-06-27   点击次数:174次

人血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)elisa试剂盒实验条件选择


血小板衍生生长因子(Platelet derived growth factor,PDGF)是贮存于血小板α颗粒中的一种碱性蛋白质。是低分子量促细胞分裂素。能刺激停滞于G0/G1期的成纤维细胞、神经胶质细胞、平滑肌细胞等多种细胞进入分裂增殖周期。血小板衍生生长因子PDGF于1974年发现的一种刺激结缔组织等组织细胞增长的肽类调节因子,因其来源于血小板而得名,正常生理状态下存在于血小板的α颗粒内,当血液凝固时由崩解的血小板释放出来并且被激活,具有刺激特定细胞趋化与促进特定细胞生长的生物活性。此外,在组织受到损伤时巨噬细胞、血管平滑肌细胞、成纤维细胞、内皮细胞、胚胎干细胞等也可以合成并释放PDGF。肝脏受损时,巨噬细胞、血小板、浸润的炎细胞、受损的内皮细胞及激活的肝星形细胞均可以分泌PDGF。以自分泌、旁分泌的方式发挥作用。结合的PDGF是分子量为30KD的热稳定糖蛋白,是靠二硫键相连的A、B两条多肽链组合成的二聚体。


在ELISA中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:


  (1) 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。


  (2) 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃ 18~24小时。蛋白质包被的最适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值最大而蛋白量最少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。


  (3) 酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法"(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。


(4) 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入。


我司销售的elisa试剂盒检测灵敏度高,特异性好,质量稳定。购买试剂盒,享受权威酶联免疫技术服务,提供 免费专业代测服务,享受零运费运输,售后完善。ELISA试剂盒,品质保证!售前售中售后全程提供技术指导,有质量问题可免费退换!


很多客户在咨询和对比试剂盒的阶段,有着各种的担心和顾虑。信帆生物承诺给你质量保证,免除你的忧虑,让您买的放心,用的舒心。


    购买本公司的elisa试剂盒,享受零运费运输,售后完善。另外还可以享受权威酶联免疫技术服务,技术熟练的操作人员, 加上精密的实验仪器,确保每一份实验数据真实可靠。本司所售的ELISA试剂盒,品质保证!售前售中售后全程提供技术 指导,有质量问题,可免费退换!


 


 

网站首页 关于我们 新闻中心 产品中心 联系我们
备案号:苏ICP备16008122号-3   GoogleSitemap   技术支持:环保在线 管理登陆
© 2018 南京信帆生物技术有限公司(www.njxfbio.com) 版权所有 总访问量:478709