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α-羟丁酸脱氢酶(HBDH)实验检测的反应方法
更新时间:2024-03-21   点击次数:92次

α-羟丁酸脱氢酶(HBDH)实验检测的反应方法

 

产品名称:α-羟丁酸脱氢酶(HBDH)实验检测

英文名称:HBDH

反应方法:IFCC(速率法)

样本类型:血清

 

背景介绍:

α-羟丁酸脱氢酶(HBDH)是一种酶,存在于人体各组织中,以心肌组织含量最多,约为肝脏的2倍,其活性达总酶活力的一半以上。它不是一个独立的特异酶,而是乳酸脱氢酶(LDH)的一种同工酶,能催化α-羟丁酸氧化为α-酮丁酸。当心肌受损时,α-羟丁酸脱氢酶就会释放到血中,所以血清α-羟丁酸脱氢酶在发生心肌疾病时明显增高。

 

检验原理:

主要基于酶促反应的动力学原理。在速率法中,通过连续监测反应过程中产物或底物的浓度变化,可以计算出酶促反应的速率,从而确定酶的活性。

对于α-羟丁酸脱氢酶(HBDH)的速率法检测,通常使用α-酮丁酸作为底物,在适当的pH和温度下,HBDH催化α-酮丁酸还原为α-羟丁酸,同时伴随着NADH(还原型烟-酰胺腺嘌呤二核苷酸)的生成。反应过程中,通过监测NADH的生成速率,可以间接推算出HBDH的活性。

 

样品收集、处理及保存方法

1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心 10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30分钟取上清。

3. 细胞上清液:3000 转离心 10 分钟去除颗粒和聚合物。

4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离10分钟取上清。

5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

 

送样须知:

1.南京和上海地区的客户可提供上门取样服务,提前一天联系

2.外地客户可邮寄样本,样本运输应符合一般的生物学要求,密封加冰袋或者干冰运输

3.若细胞、血清、组织样本具有潜在的传染性或致病性,请务必提前告知

4.测试结束提供实验报告后,样本可以保留1个月,若需保留样本或者回收样本请提前告知。


备注:本公司对客户的项目的专有技术和资料(包括实验方案,测试结果,样本等)负有绝对保密的责任。


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