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信帆生物提供:PCR实验代测服务
更新时间:2024-05-09   点击次数:54次

信帆生物提供:PCR实验代测服务

信帆生物专业提供RT-PCR代测服务。客户只需要提供样本,其他所有试剂均由本公司提供。一般2周左右出结果,提供原始数据,分析数据,实验报告,原始图片,动力扩增曲线图,实验室所用仪器型号,图片等。

 

服务内容:

  1. 制定个性化实验方案:根据不同的实验目的确定实验方案、选定合适的内参;

   2.检测类别:mRNA、miRNA、lncRNA、DNA;

   3.样本抽提及质检:对客户提供样本进行RNA抽提,并利用NanoDrop进行样本质检; 

   4.定量PCR预实验:包括样本反转录为CDNA、配置PCR反应体系及进行Real-TimePCR反应;

   5.正式定量PCR实验:根据预实验结果进行正式实验;

   6.数据分析:采用2- △△CT法进行分析,比较不同样本间差异。 

 

服务要求:
1.请提供组织样本,细胞样本,血浆或血清样本,totalRNA;
2.请提供已知的全长基因序列或GeneBank号;
3.请提供尽可能详细的背景资料:DNA/RNA来源、基因丰度等。 

 

结果内容:整理好的报告,样本收到之日起5个工作日内反馈质检结果。

结果展示:样本质检图

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溶解曲线

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扩增曲线:

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数据统计:

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每个指标有2张图。一张是扩增曲线,另一张是熔解曲线,用来证明PCR扩增中无非特异性扩增

 

送样运输要求:

1. 样品处理

 a. 动物组织:常规组织,脂肪组织,结缔组织,纤维化组织适当增加。将组织剪切成合适大小后(建议组织块长宽高均不大于0.5 cm),然后迅速完-全浸泡于5~10倍体积的RNAsolidTM试剂中。(注意:已浸入RNAsolidTM试剂中的组织经平衡一段时间后,可从溶液中取出,切成更小的组织块,再重新放回RNAsolidTM试剂中;有些比较弱的液体渗透性组织如骨头等,不适合用RNAsolidTM试剂进行RNA保护。)

 b.植物组织:新鲜的叶、果肉、种子最少100 mg。将嫩叶,嫩茎组织切成合适的大小(建议长宽高均不大于0.5 cm)后,然后迅速完-全浸泡于5~10倍体积的RNAsolidTM试剂中。(注意:某些植物组织天生具有的屏障,如叶子表面的蜡层可阻碍RNAsolidTM试剂的渗透,对于此类组织,通常需破坏这些屏障层以允许溶液的浸透。)

 c.细胞等样本:收集不小于10^6个细胞的沉淀(用PBS清洗1-2次)。之后迅速加入5~10倍体积的RNAsolidTM试剂。

 d.酵母、细菌等样本:离心弃上清,收集小米粒大小的单菌体沉淀,然后迅速加入适量的RNAsolidTM试剂完-全浸没菌体沉淀。

e. RNA样品: OD260/280为1.8-2.0,浓度≥100 ng/μL,体积≥20μL,干冰运输。

    f.cDNA:cDNA原液≥20 μL,干冰运输。

 

2. 样品保存及运输

 加入有RNAsolidTM试剂的样本可在37℃保存1~2天,2天以后部分组织中的RNA会开始降解。室温(25℃)稳定保存1周,不会有明显的RNA降解发生。大部分样品置于RNAsolidTM试剂中,4℃条件下可稳定保存1个月,不会有明显的RNA降解发生。长期存放可先将保存在RNAsolidTM试剂中的样本4℃浸透过夜,然后将RNAsolidTM试剂吸出弃去,再将样本放入-20℃或-80℃长期稳定保存3~5年。

 

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