新一代测序*Illumina宣布将拓展到医学诊断领域。这家公司表示，它已组建了一个名为Grail的公司，希望利用Illumina的测序技术来实现癌症筛查，直接检测血液中的循环核酸。

这样的检测有时被称为“液体活检（liquid biopsies）”，主要有两种形式。Grail检测的是循环肿瘤DNA（ctDNA）。另外一些人希望通过完整的细胞来诊断疾病和评估预后和疗效，这些细胞被称为循环肿瘤细胞（CTC）。

CTC就像矿井中的金丝雀，警告着肿瘤的存在和分子特征，而此时疾病可能还没有症状。据Janssen Diagnostics的研发主管Ron Mazumder介绍，它们的丰度与病人预后密切相关。“对于转移性乳腺癌、结肠直肠癌和前列腺癌，你可以根据CTC的数量将病人分为预后较好或较差的。”

然而，找到它们谈何容易，CTC是极其的。MilliporeSigma（Millipore与Sigma-Aldrich合并而成）的科学家Brian Hall表示：“在1 ml血液中，大约有700万个白细胞和10个CTC，这真的是大海捞针。”当然，CTC的确切数量因病人而异，也随着疾病进程和治疗而改变。

为此，研究人员和各家公司设计出几种策略来帮助你捞针1。

正选和负选

由于CTC如此，大多数的CTC分析工具都采用两种基本策略之一。在正选方法中，CTC是利用磁珠偶联的抗体来浓缩的，这些抗体针对已知的CTC抗原。例如，Janssen Diagnostics的CellSearch检测就利用了许多上皮性肿瘤都表达EpCAM的现象来富集CTC，这种检测已被美国FDA批准。之后用DAPI和细胞角蛋白对分离出的细胞进行染色，以确保它们是CTC，并通过白细胞标志物CD45复染，确定它们不是白细胞。

负选策略则利用抗体来去除那些不是CTC的细胞，例如，表达CD45的。对于某些肿瘤而言，这种策略可能更优，因为不依赖所表达的CTC抗原。

据美天旎的肿瘤学研究Olaf Hardt介绍，这两种策略都不能地回收CTC。细胞聚集成团，因此在负选过程中可能将宝贵的CTC与洗澡水一起倒掉。同理，正选策略也不可避免地会保留一些非CTC。因此，研究人员经常将正选与负选相结合，在下游分析中配对使用，如显微镜和流式细胞仪。

当然，这些策略依赖于生物标志物的鉴定，这些标志物定义了感兴趣的CTC。并非所有CTC都是EpCAM阳性的，非上皮性肿瘤，如黑色素瘤，就不是。那些经历了上皮-间质转化的肿瘤，也不是，赛默飞世尔的肿瘤产品主管Jason Johnson谈道。

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