溴化氰活化琼脂糖凝胶配体偶联的操作过程太精彩
信帆生物提供的溴化氰活化4B/6B琼脂糖凝胶是一种活化中间体填料，它是通过溴化氰和琼脂糖上面的羟基反应生成活化的氰酸酯基团。蛋白质、多肽、氨基酸等可以偶联到溴化氰活化4B/6B琼脂糖凝胶上。
产品的优点：
偶联条件温和，效率高；可偶联含有氨基的配体，应用范围广。
产品指标
产品牌号 | 溴化氰活化4B琼脂糖凝胶 | 溴化氰活化6B琼脂糖凝胶 |
基质 | seplite 4B | seplite 6B |
颗粒大小 | 平均粒径90μm（50-160μm） | |
偶联能力 | 20~60mgα-胰凝乳蛋白酶原/ml凝胶 | |
线性流量 | 75cm/h（25℃），直径1.6cm色谱柱，5cm柱床高 | |
高温高压 | 不耐受 | |
pH稳定性 | 2–11 | |
化学稳定性 | 常见溶液中可以保持稳定。可以耐受非离子型去污剂、变性溶剂，如8 M尿素和6 M盐酸胍。也可以耐受50%二甲基甲酰胺和50%二氧六环等有机溶剂。 | |
保存 | 2~8℃ | |
一般配体偶联的过程如下：
（1）将所需要偶联的配基溶解到 pH 8.3含有0.5mol/LNaCl的0.1mol/LNaHCO3 缓冲溶液中，加入溶胀好的溴化氰活化4B/6B琼脂糖凝胶。
（2）在室温中搅拌反应2~4小时或者在4℃下过夜反应。
（3）反应*后，用5倍反应体积的偶联缓冲液洗涤掉其中多余的配体，10倍体积的水洗。
（4）将反应完洗涤过的凝胶悬浮到水中，加入乙醇胺（1mol/L）或者pH8.0的Tris-HCl缓冲液，在常温下至少搅拌反应2小时，以消除残余活性基团。
（5）用含有0.5mol/LNaCl的0.1mol/L醋酸盐缓冲液（PH 4.0）和含有0.5mol/LNaCl的0.1mol/L Tris-HCl缓冲液（PH 8）交替洗涤，至少重复以上循环洗涤3次。用10倍柱体积的PBS洗涤。
琼脂糖凝胶是依靠糖链之间的次级链如氢键来维持网状结构，网状结构的疏密依靠琼脂糖的浓度。一般情况下，它的结构是稳定的，可以在许多条件下使用（如水，pH4-9范围内的盐溶液）。琼脂糖凝胶在40℃以上开始融化，也不能高压消毒，可用化学灭菌活处理。
作用：
制成的小颗粒用于凝胶过滤。适于用sephadex不能分级分离的大分子的凝胶过滤，若使用5%以下浓度的凝胶，也能够分级分离细胞颗粒、病毒等。利用其吸附性小的特点，有时用它代替琼脂、以作为免疫电泳或凝胶内沉降反应的支持物。
信帆生物-溴化氰活化琼脂糖凝胶4B偶联条件温和，效率高应用范围广。
在线咨询