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T细胞亚群检测试剂盒简直太好用了
更新时间:2020-08-14   点击次数:876次

T细胞亚群检测试剂盒简直太好用了

 

标本制备:

取肝素抗凝(25μl/ml)的静脉血1~2ml,PBS稀释1-2倍后,沿装有等量淋巴细胞分离液的试管壁混匀缓慢加至液面上层,保持两种液体界面清晰,离心(2000转/分)15-20分钟,吸取两液面交界处的单个核细胞层,加5倍PBS,离心(1000转/分)5分钟,弃上清液,沉淀即为单个核细胞。利用试管中剩余的少许回流液体(约一滴)混匀细胞,制成单个核细胞悬液。滴30μl细胞悬液于载玻片上,静置2分钟使细胞下沉粘附于玻片上,吸去液体,快速吹干或37℃温箱1小时烤干。或用PBS将单个核细胞调至2×105个/ml,离心涂片机1000转离心1-2分钟制片,快速吹干或37℃温箱1小时烤干。涂片前取防脱片剂5-10μl均匀推片,亦可用棉签粘取防脱片剂均匀涂于干净玻片上,待干后制备细胞涂片,以防掉片。

 

T细胞研究中通常研究的三个亚型包括

●杀伤性T细胞(细胞毒性T淋巴细胞: CD8+) ,这种细胞可识别抗原,抗原由与宿主细胞结合的致病原释放。杀伤性T细胞能够识别不同的细胞类型和病原体并与其发生相互作用。T细胞受体结合外来抗原,触发细胞毒素释放进入受感染的细胞,导致细胞死亡。

●辅助T细胞(Th细胞: CD4+),可促进免疫系统对抗感染。Th细胞识别并结合致病抗原,导致可溶性因子(细胞因子)的释放,进而将信号传导至免疫系统的其余部分以启动应答。Th细胞分为不同的亚型,包括Th1细胞和Th2 细胞。Th1细胞可结合具有吞噬功能的巨噬细胞和树突细胞。Th2 细胞结合和激活B细胞,这是产生抗体的必要过程,从而保证对特定细菌或病毒感染的终生免疫力。

●调节性T细胞(Treg 细胞: CD4+、 CD25+、Foxp3+、 CD127+),可保持免疫系统功能正常。一旦发生了免疫反应,这类细胞可确保反应得到终止。这种调节机制抑制了免疫活性,从而防止过度免疫反应。正常运作的Treg 细胞对预防自身免疫病至关重要。

注意事项:

1.免疫细胞化学检测是一种包含多步骤的检测方法,试剂的选择、样本的处理、涂片的制备、染色及其结果的判读均需要进行专业的培训。
2.任何阳性或阴性的解读,应由病理科医生结合病理形态学,表现及其它检测方法进行,不作为单独的诊断指标。
3.复染过度或不足都可能影响结果的判读。
4.阴性结果表示未检出抗原,不一定表示样本中无该抗原存在,待测抗原编码基因变异,抗原低表达或抗原修复不当等,都会造成抗原无法检出。
5.本试剂仅对经处理的人外周血细胞进行验证,不做其他用途
6.试剂盒使用中,应有适当的防护措施,以避免试剂同皮肤和眼睛接触。

 

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