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尼罗红的使用说明!
更新时间:2022-02-14   点击次数:13641次

尼罗红的使用说明!

尼罗红是一种亲脂性的恶嗪类荧光染料,对光敏感,与脂类物质结合并发出荧光,在激发波长530nm激发下,显示强烈桔红色荧光。同时在紫外光的照射下显示红色。另外,也可用于蛋白质染色。

产品名称:尼罗红

英文名称:9-(diethylamino)benzo[a]phenoxazin-5(5H)-one

分子式:C20H18N2O2

分子量:318.37

产品规格:100mg

纯度:≥95%

外观:墨绿色粉末

溶解性:1mg/mL in EtOH

荧光光谱Ex/Em:530nm/635nm

保存条件:RT,避光,有效期3年

产品说明:

一、工作液制备

1)母液准备:取适量的尼罗红用无水 DMSO 充分溶解制备 1mM 储存液,按照单次用量分装冻存,避免反复冻融,避光保存。

2)工作液准备:用 HHBS 或生理缓冲液,pH 7将母液按 1:1000 稀释为尼罗红工作液,漩涡混匀。

【注】:尼罗红的实际染色浓度请参考文献或实验室体系来调整。

二、染色步骤

1)用检测化合物处理细胞一段时间;

2)离心并调整细胞浓度为 1-5×105cell/管;

3)用 500µl 尼罗红工作液重悬细胞;

4)室温或 37ºC避光孵育 5-10min;

5)吸掉染色工作液,用 HHBS 或适当缓冲液清洗细胞;

6)用500µl 预热的 HHBS 或培养基重悬细胞,使细胞密度为 1-5×105cell/管;

7)荧光显微镜或流式细胞仪检测荧光信号,Ex/Em = 552/636 nm;

【注】

●对于贴壁细胞,可用 HHBS 或适当缓冲液清洗细胞,然后直接加入尼罗红工作液孵育。

●细胞也可预固定,然后用尼罗红工作液染色。

注意事项:

1)本品仅供科研实验用,不做其它用途。

2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


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