尼罗红的使用说明！

尼罗红是一种亲脂性的恶嗪类荧光染料，对光敏感，与脂类物质结合并发出荧光，在激发波长530nm激发下，显示强烈桔红色荧光。同时在紫外光的照射下显示红色。另外，也可用于蛋白质染色。

产品名称：尼罗红

英文名称：9-(diethylamino)benzo[a]phenoxazin-5(5H)-one

分子式：C20H18N2O2

分子量：318.37

产品规格：100mg

纯度：≥95%

外观：墨绿色粉末

溶解性：1mg/mL in EtOH

荧光光谱Ex/Em：530nm/635nm

保存条件：RT，避光，有效期3年

产品说明：

一、工作液制备

1）母液准备：取适量的尼罗红用无水 DMSO 充分溶解制备 1mM 储存液，按照单次用量分装冻存，避免反复冻融，避光保存。

2）工作液准备：用 HHBS 或生理缓冲液，pH 7将母液按 1:1000 稀释为1×尼罗红工作液，漩涡混匀。

【注】：尼罗红的实际染色浓度请参考文献或实验室体系来调整。

二、染色步骤

1）用检测化合物处理细胞一段时间；

2）离心并调整细胞浓度为 1-5×105cell/管；

3）用 500µl 尼罗红工作液重悬细胞；

4）室温或 37ºC避光孵育 5-10min；

5）吸掉染色工作液，用 HHBS 或适当缓冲液清洗细胞；

6）用500µl 预热的 HHBS 或培养基重悬细胞，使细胞密度为 1-5×105cell/管；

7）荧光显微镜或流式细胞仪检测荧光信号，Ex/Em = 552/636 nm；

【注】

●对于贴壁细胞，可用 HHBS 或适当缓冲液清洗细胞，然后直接加入尼罗红工作液孵育。

●细胞也可预固定，然后用尼罗红工作液染色。

注意事项:

1）本品仅供科研实验用，不做其它用途。

2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。