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牛I型胶原C端肽(CTX-I)ELISA检测试剂盒现货供应!
发布时间:2022-03-03   点击次数:82次

牛I型胶原C端肽(CTX-I)ELISA检测试剂盒现货供应!

信帆生物供应牛I型胶原C端肽(CTX-I)ELISA检测试剂盒,产品质量稳定,库存充足,欢迎前来咨询!

检测原理

试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被牛I型胶原C端肽(CTX-I)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并澈底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的牛I型胶原C端肽(CTX-I)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。

样品收集、处理及保存方法

1.血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2.血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。

3.细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4.组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。

5.保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20°C,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

自备物品

1.酶标仪(450nm)

2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3.37°C恒温箱

操作步骤

1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4°C。

2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;

3.待测样本孔先加待测样本10μL,再加样本希释液40μL;

4.随后标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37°C水浴锅或恒温箱温育60min。

5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。

6.每孔加入底物A、B各50μL,37°C避光孵育15min。

操作注意事项

1.试剂盒保存在2-8°C,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶wan全溶解后再使用。

2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。

3.预处理后的样本无需稀释,直接取10μL加样即可。

4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

5.所有液体组分使用前充分摇匀。

6.本产品仅供科研实验用,不做其它用途。


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