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人可溶性ST2(sST2 )酶联免疫分析

点击次数:1153 发布时间:2019/8/5
提 供 商: 南京信帆生物技术有限公司 资料大小:
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人 可 溶 性ST2 (sST2 ) 酶 联 免 疫 分 析
试 剂 盒 使 用 说 明 书
本试剂盒仅供研究使用。
检 测 范 围 : 96T
1.2ng/L -40ng/L
使 用 目 的 :
本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中可溶性 ST2(sST2)含量。
实 验 原 理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人可溶性 ST2(sST2)水平。用纯化的人可溶性
ST2(sST2)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入可溶性 ST2
(sST2),再与 HRP 标记的可溶性 ST2(sST2)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,
经过*洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下
转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的可溶性 ST2(sST2)呈正相关。用酶标仪在 450nm
波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中人可溶性 ST2(sST2)浓度。
试 剂 盒 组 成
1 30 倍浓缩洗涤液 20ml×1 瓶 7 终止液 6ml×1 瓶
2 酶标试剂 6ml×1 瓶 8 标准品(80 ng/L) 0.5ml×1 瓶
3 酶标包被板 12 孔×8 条 9 标准品稀释液 1.5ml×1 瓶
4 样品稀释液 6ml×1 瓶 10 说明书 1 份
5 显色剂 A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 张
6 显色剂 B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 个
标 本 要 求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操 作 步 骤
1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。
40ng/L 5 号标准品 150µl 的原倍标准品加入 150µl 标准品稀释液
20ng/L 4 号标准品 150µl 的 5 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
10ng/L 3 号标准品 150µl 的 4 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
5.0ng/L 2 号标准品 150µl 的 3 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
2.5ng/L 1 号标准品 150µl 的 2 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、
待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50µl,待测样品孔中先加样品稀释液 40µl,
TSZ 分装
然后再加待测样品 10µl(样品终稀释度为 5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽
量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4. 配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此
重复 5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂 50µl,空白孔除外。
7. 温育:操作同 3。
8. 洗涤:操作同 5。
9. 显色:每孔先加入显色剂 A50µl,再加入显色剂 B50µl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
10 分钟.
10. 终止:每孔加终止液 50µl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止
液后 15 分钟以内进行。

 
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