显色剂是elisa试剂盒中*的试剂之一。
什么是显色剂?就是能够和某些试剂反应生成特殊的颜色的试剂。常用于鉴识某种生物碱。但显色反应受生物碱纯度的影响很大,生物碱愈纯,颜色愈明显。常用的显色剂有:
(1)矾酸铵一浓硫酸溶液(Mandelin试剂)为1%矾酸铵的浓硫酸溶液。如遇阿托品显红色,可待因显蓝色,shide宁显紫色到红色。
(2)钼酸铵一浓硫酸溶液(Frohde试剂)为1%钼酸钠或钼酸铵的浓硫酸溶液,如遇wutou碱显黄棕色,小檗碱显棕绿色,阿托品不显色。
(3)甲醛一浓硫酸试剂(Marquis试剂)为30%甲醛配置溶液0.2ml与10ml浓硫酸的混合溶液。如遇显橙色至紫色,可待因显红色至黄棕色。
(4)浓硫酸 如遇wutou碱显紫色、小檗碱显绿色,阿托品不显色。
(5)浓硝酸 如遇小檗碱显棕红色,秋水仙素显蓝色,coffee碱不显色。
碘:
适用于不饱和或者芳香族化合物
配制方法:在100ml广口瓶中,放入一张滤纸,少许碘粒。 或者在瓶中,加入10g碘粒,30g硅胶
KMNO4
适用于含还原性基团化合物,比如羟基,氨基,醛
配制方法 :1.5g KMnO 4 + 10g K 2 CO 3 + 1.25mL 10% NaOH + 200mL 水. 使用期3个月
磷钼酸(PMA)
广谱
配制方法 :10 g of 磷钼酸+100 mL 乙醇
紫外灯
适用于含共轭基团的化合物,芳香化合物
硫酸铈
生物 碱
配制方法:10%硫酸铈(IV)+15%硫酸的水溶液
氯化铁
苯酚类化合物
配制方法:1% FeCl 3 + 50% 乙醇水溶液.
桑色素(羟基黄酮)
广谱, 有荧光活性
配制方法:0.1% 桑色素+甲醇
茚三酮
适用于 氨基酸
配制方法:1.5g 茚三酮 + 100mL of 正丁醇+ 3.0mL 醋酸
二硝基苯肼(DNP)
适用于醛和酮
配制方法:12g二硝基苯肼+ 60mL 浓硫酸 + 80mL 水 + 200mL 乙醇
(香兰素)
广谱
配制方法:15g + 250mL 乙醇 +2.5mL 浓硫酸
溴甲酚绿
适用于羧酸,pKa<=5.0
配制方法 :在100ml乙醇中,加入0.04g溴甲酚绿,缓慢滴加0.1M的NaOH水溶液,刚好出现蓝色即至。
钼酸铈
广谱
配制方法:235 mL 水 + 12 g 钼酸氨 + 0.5 g 钼酸铈氨 + 15 mL 浓硫酸
茴香醛(对甲氧基苯甲醛)1
广谱
配制方法:135 乙醇 + 5 mL 浓硫酸 + 1.5 mL of 冰醋酸 + 3.7 mL 茴香醛,剧烈搅拌,使混合均匀.
茴香醛(对甲氧基苯甲醛)2
适用于萜烯,桉树脑(cineoles), withanolides, 出油柑碱(acronycine)
配制方法:茴香醛:HClO4:丙酮:水 (1:10:20:80)