一氧化氮(NO)测试盒,*,欢迎抢购!
一氧化氮NO(即血管内皮舒张因子),在生物体内作为一种反应性*的自由基,兼有信使和神经递质作用,同时又是一种效应分子,在体内具有广泛的shen理作用,如松弛血管平滑肌,抑制血小板聚集,调节脑血流,介导细胞毒效应和免疫调节,参与学习和记忆、动脉粥样硬化等作用。NO产生异常于某些疾病的发生有着密切关系。
NO本身半衰期极短,血液中的NO主要由血管内皮细胞、血管平滑肌细胞、血小板、巨噬细胞等产生以硝酸盐及亚硝酸盐的形式存在,通过其浓度可以间接测得NO的浓度。
NO遇氧及水生成硝酸盐及亚硝酸盐,后二者遇硝酸盐显色剂可生成淡红色偶氮化合物,通过检测可得知NO 浓度。
试剂组成 | 保存及有效期 | 备注 |
试剂一,20mlx1瓶 | 4°C保存一年 |
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试剂二,10mlx1瓶 | 4°C保存一年 |
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试剂三,10mlx1瓶 | 4°C避光保存 | 过饱和溶液,如果结晶析出,60°C以上加热溶解*以后使用 |
试剂四,3mlx1瓶 | 4°C避光保存 |
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试剂五,3mlx1瓶 | 4°C保存 |
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2mmol/L标准液,1mlx1支 | 4°C保存 |
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显色剂的配置: 试剂三:试剂四:试剂五=2.5:1:1,现用现配,配好的显色剂放冰箱保存,颜色变得很深后不可使用
20umol/L标准液配置:取2mmol/L标准液0.1ml加双蒸水定容到10ml即为20umol/L 标准液,现用现配。
血清(血浆):取血清(血浆)原液100ul加试剂一200ul,混匀,加试剂二100ul,漩涡充分混匀后静置10分钟,3500-4000转/分钟,离心15分钟,取上清160ul操作。
组织:取10%匀浆上清300ul加试剂一200ul,混匀,加试剂二100ul,漩涡充分混匀后静置10分钟,3500-4000转/分钟,离心15分钟,取上清160ul操作。
| 空白孔 | 标准孔 | 测定孔 |
双蒸水 | 160ul |
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20umol/L标准液 |
| 160ul |
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上清液 |
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| 160ul |
显色剂 | 80ul | 80ul | 80ul |
混匀,静置15分钟,波长550nm,用酶标仪测定各孔吸光度OD值。
A. 取血清0.1ml,按照测定要求所示,进行操作,所得空白孔吸光度为0.0406,标准孔为0.4117,测定孔吸光度0.0795,计算如下:
NO含量= (0.0795-0.0406)÷(0.4117-0.0406)X20X4=8.38 umol/L
B. 取10%组织匀浆上清,按照测定所示要求,进行操作,所得空白孔吸光度为0.0406,标准孔吸光度为0.4117,测定孔吸光度0.0543,同时测得组织匀浆上清中总蛋白浓度为11.6574gprot/L,计算如下:
NO含量= (0.0543-0.0406) ÷(0.4117-0.0406)x20x2÷11.6574=0.127umol/gprot