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大鼠血红素氧合酶2(HO-2)elisa试剂盒使用说明书
发布时间:2017-04-26   点击次数:488次

大鼠血红素氧合酶2(HO-2)elisa试剂盒基本信息简介

1(HO-1)是血红素降解的限速酶,将血红素转变为胆绿素IX,CO和铁,胆绿素随即被还原为胆红素。已知HO有3种同工酶,HO - 1,HO - 2,HO - 3.HO - 2和HO - 3呈组成型大量表达,它们可能作为正常细胞内的血红素结合分别而发挥其功能。而HO - 1属诱导型,HO - 1广泛分布于哺乳动物多种组织细胞中;HO - 1可由多种刺激因子诱导表达,如氧化应激、热休克、紫外线照射、缺血再灌注、重金属、细菌脂多糖、细胞因子和NO以及其底物血红素。zui近的研究重点已集中在此酶促反应产物的生物学效应上,它们具有抗氧化、抗炎、抗凋亡、信号传导和免疫调节以及抑制黏附分子表达活性等作用。HO - 1对各种刺激因子的强大的适应性反应揭示,可能在阻止炎症过程和氧化性组织损伤中具有重要的作用。

已有研究报道,HMOX2基因与藏族人的高原适应有密切关系。藏族人较低的血红蛋白浓度被认为是适应高原的特征之一,而HMOX2基因直接调控着血红蛋白分子中亚铁血红素的分解代谢,这个过程可能是造成血红蛋白浓度偏低的重要原因之一。

大鼠血红素氧合酶2(HO-2)elisa试剂盒使用注意事项简介

收集标本前都必须有一个完整的计划,必须清楚要检测的成份是否足够稳定。我们提倡新鲜标本尽早检测,对收集后当天就进行检测的标本,及时储存在4℃备用,如有特殊原因需要周期收集标本,请造模取材后,将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。因冰室与室温存在一定温差,蛋白极易降解,直接影响实验质量,所以避免反复冻融。

1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。

2. 血浆:应根据试剂盒的要求选择 EDTA 、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,加入 10 %( v/v )抗凝剂( 0.1M 柠檬酸钠或 1% heparin 或 2.0%EDTA.Na2) 混合 10-20 分钟后,离心 20 分钟左右( 2000-3000 转 / 分)。仔细收集上清。如有沉淀形 成,应再次离心。

3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。

6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.

7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

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