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大鼠诱导型一氧化氮合酶(iNOS)elisa试剂盒太好用了
发布时间:2017-07-24   点击次数:529次

大鼠诱导型一氧化氮合酶(iNOS)elisa试剂盒基本信息简介

一氧化氮合酶(NOS)是一种同工酶,分别存在于内皮细胞、巨噬细胞、神经吞噬细胞及神经细胞中。一氧化氮合酶存在于神经元中,在不同脑区呈选择性分布。因为一氧化氮很不稳定,因而研究生成一氧化氮的酶似乎更容易些,特别是一氧化氮合酶拮抗剂的发现,大大促进了一些一氧化氮功能的研究。一氧化氮合酶一氧化氮合酶于神经系统,其同功酶有三种亚型,即在正常状态下表达的神经元型一氧化氮合酶(nNOS)和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)以及在损伤后诱导表达的诱导型一氧化氮合酶(iNOS)。来源于诱导型一氧化氮合酶和神经元型一氧化氮合酶的一氧化氮合酶有神经 毒性作用,来源于内皮型一氧化氮合酶的一氧化氮有神经保护作用。其中以海洋生物为主要原料提取出来的酶一种内皮一氧化氮合酶 学术名称:“ 一氧化氮海洋合酶” (NOSS),这种酶的活性更高,可以在增强体内一氧化氮循环机制作用,*的产生一氧化氮。但是这种酶很少见,必须是由海洋生物 尖海龙、牡蛎、鱼精蛋白等海洋珍贵物种才能取提产生出来。

大鼠诱导型一氧化氮合酶(iNOS)elisa试剂盒温育与洗涤

温育

  ELISA反应是抗原、抗体的结合在固相表面上发生的一系列的反应,抗原抗体结合是一个逐步平衡的过程,需要经过扩散才能达到反应的终点,因此ELISA反应需要一定时间的温育。温育也是影响检测结果的关键因素,尤其是对弱阳性标本影响zui为明显[2]。温育方式常采用温箱法、微波辐射法和水浴法。其中水浴法能较好地解决因受热不均衡所致的周围孔与中央孔结果的吸光度差异(即“边缘效应”)。温育常采用的温度是43℃、37℃、室温和4℃,其中zui常用的是37℃,也是大多数抗原抗体反应的适合温度。为了保证各板的温度能迅速平衡,可将反应板放在水浴箱中,漂浮在水面上,但反应板不应叠放。为避免标本或稀释液蒸发而吸附于孔壁,反应板应加盖或贴封纸。注意温育的温度和时间,应按规定力求准确无误。因为孵育时间过长,可以出现非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗彻底,导致花板。

洗涤

洗涤是ELISA不同于均相免疫学检测技术的一大特征,洗涤在整个ELISA反应过程虽不是一个反应步骤却非常关键。操作者应严格按照要求洗涤,因为ELISA试验就是依靠洗涤来达到分离游离的酶标记物和结合的酶标记物的目的。通过洗涤,可以清除残留在板孔中没有与固相抗原或抗体结合的物质,以及在反应过程中非特异性地吸附于固相载体的干扰物质。采用自动洗板机洗板,洗板机设置时间、间隔、次数要保持一致,不能过多或过少。洗板次数较少,造成残留,引起假阳性结果。洗板次数过多,可造成抗原抗体结合物洗脱,造成假阴性结果。要保证洗液注满各孔,防止在反应孔中形成气泡而造成洗涤不充分。洗板结束后,在干净无尘的吸水纸上轻轻拍干。如洗液量不足可致洗板不彻底,洗板针堵塞,抽吸不完全,洗板不畅,导致洗板效果差。

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