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卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LCAT)ELISA试剂盒促销啦
发布时间:2017-09-20   点击次数:464次

卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LCAT)ELISA试剂盒基本信息

LCAT由肝脏合成,在血浆发挥酶作用。它催化HDL中的卵磷脂-2-脂肪酸转移到FC,生成CE和溶血磷脂。血在以上Apo的作用下,LCAT可对FC和CE作双向调节。LCAT选择性底物为HDL,对VLDL和LDL几乎不起作用。遗传性和继发性LCAT缺陷、酒精中毒性肝炎时,出现HDL代谢异常。

卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LCAT)ELISA试剂盒检测技术简介

双抗体夹心法

  1. 包被:用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃ 过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。

  2. 加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃ 孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。

  3. 加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小时,洗涤。

  4. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。

  5. 终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。

  6. 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。

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