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丙酮酸激酶(PK)elisa试剂盒太好用啦!
发布时间:2017-10-04   点击次数:410次

丙酮酸激酶(PK)elisa试剂盒简介

丙酮酸激酶,别名丙酮酸磷转称酶、磷酸丙酮酸激酶,其分子式wieC9H9N,缩写式为ATP:丙酮酸-2-O-磷酸转移酶。在糖酵解系统里,它是催化形成第二个ATP反应的酶。EC2.7.1.40。能以磷酸烯醇(phosphoenolpyruv- ate)丙酮酸和ADP生成丙酮酸和ATP·ΔGo1=-7.5kcal。除需要二价金属离子外(Mg2+和Mn2+)外,还需要一价金属离子(K+.Rb+,Cs+),在生理上起作用的大概是K+。分子量约25万。是催化ADP为ATP的形成,结果是形成丙酮酸的终产物。

中文名称

丙酮酸激酶

别称

丙酮酸磷转称酶;磷酸丙酮酸激酶

EINECS登录号

232-616-2

CAS登录号

9001-59-6

化学式

wieC9H9N

英文名

Kinase(phosphorylating), pyruvate

丙酮酸激酶(PK)elisa试剂盒实验条件选择给您  

在ELISA中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:

  (1) 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。

  (2) 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃ 18~24小时。蛋白质包被的zui适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值zui大而蛋白量zui少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。

  (3) 酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。

(4) 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入。

购买我司elisa试剂盒可以提供免费代测服务,客户准备好样本,上海和南京地区的客户可以提供免费上门取样服务。其他地区的客户,样本用泡沫箱子包好,放干冰或者冰袋寄送给我们。代测时间为5到7个工作日提供原始数据,分析数据, 实验操作步骤以及实验所用仪器。

 

 

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