大鼠前列腺素E2使用说明,PGE2检测试剂盒
大鼠前列腺素E2使用说明,PGE2检测试剂盒的样本实验准备
在收集样本前都必须有一个完整的计划,必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天就进行检测的样本,及时储存在4℃备用。对于隔天再检测的样本,及时分装后冻存在-20℃备用,有条件的,-70℃冻存备用。标本应避免反复冻融。
液体类标本: 包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中前列腺素E2(PGE2)含量。
大鼠前列腺素E2使用说明,PGE2检测试剂盒实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠前列腺素E2(PGE2)水平。用纯化的大鼠前列腺素E2(PGE2)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入前列腺素E2(PGE2),再与 HRP 标记的前列腺素E2(PGE2)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的前列腺素E2(PGE2)呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中大鼠前列腺素E2(PGE2)浓度。
试剂盒组成
试剂盒组成 | 48T | 96T | 保存 |
说明书 | 1份 | 1份 |
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封板膜 | 2片(48) | 2片(96) |
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密封袋 | 1个 | 1个 |
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酶标包被板 | 1×48 | 1×96 | 2-8℃保存 |
标准品(960ng/L) | 0.5ml×1瓶 | 0.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
标准品稀释液 | 1.5ml×1瓶 | 1.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
酶标试剂 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
样品稀释液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
显色剂A液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
显色剂B液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
终止液 | 3ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
浓缩洗涤液 | (20倍)20ml×1瓶 | (30倍)20ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
操作步骤
480ng/L | 5 号标准品 | 150µl 的原倍标准品加入 150µl 标准品稀释液 |
240ng/L | 4 号标准品 | 150µl 的 5 号标准品加入 150µl 标准品稀释液 |
120ng/L | 3 号标准品 | 150µl 的 4 号标准品加入 150µl 标准品稀释液 |
60ng/L | 2 号标准品 | 150µl 的 3 号标准品加入 150µl 标准品稀释液 |
30ng/L | 1 号标准品 | 150µl 的 2 号标准品加入 150µl 标准品稀释液 |
重复 5 次,拍干。
计算
以标准物的浓度为横坐标,OD 值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD 值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与 OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的 OD 值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数, 即为样品的实际浓度。
注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未 用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间 控制在 5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本 OD 值 大于标准品孔第一孔的 OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计 算时请zui后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
检测范围
15ng/L – 480ng/L
保存条件及有效期
1.试剂盒保存:2-8℃
2.有效期:6 个月
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