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超氧阴离子检测试剂盒计算公式和产品说明!
发布时间:2018-07-18   点击次数:579次

超氧阴离子检测试剂盒计算公式和产品说明!

 

规格:50T/48S

产品内容:
提取液:液体100mL×1 瓶,4℃保存。
试剂一:液体32mL×1 瓶,4℃保存。
试剂二:液体25mL×1 瓶,4℃避光保存。
试剂三:液体25mL×1 瓶,4℃避光保存。
试剂四:lv仿,自备。
亚硝酸钠标准品:液体1mL×1 支,4℃保存。10μmol/mL 亚硝酸钠。

 

产品说明:
生物体内超氧阴离子等活性氧具有免疫和信号传导的作用,但积累过多时会对细胞膜及生物大
分子产生破坏作用,导致机体细胞和组织代谢异常,从而引起多种疾病。

超氧阴离子与盐酸羟胺反应生成NO2-,NO2-在对氨基苯磺酰胺和萘乙二胺盐酸盐的作用下,
生成红色的偶氮化合物,在530nm 有特征吸收峰,根据A530 值可以计算样品中O2-含量。

 

自备实验用品及仪器:
天平、水浴锅、离心机、可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿、lv
仿和蒸馏水。

 

 

超氧阴离子检测试剂盒计算公式和产品说明!

操作步骤:
一、超氧阴离子提取
1. 植物、动物组织:称取约0.1g 样本,加入提取液1mL,充分研磨,12000rpm,4℃,离心20min,
取20μL 上清测定蛋白含量,其余上清作为待测样本。
2. 标准溶液的制备
取适量亚硝酸钠标准液,首先16 倍稀释至0.625μmol/mL,然后进行倍比稀释至0.3125、
0.15625、0.078、0.039、0.0195、0.009765、0.0049、0.00244、0.0012、0.0006umol/mL 梯度稀释
的标准溶液,用0.3125、0.15625、0.078、0.039、0.0195、0.009765、0.00244、0.0006umol/mL
标准管做标准曲线。
3. 血清或培养液:直接测定。

 

超氧阴离子含量计算公式
1.标准曲线的绘制
以ΔA 标准为y 轴,标准溶液浓度为x 轴,绘制标准曲线y=kx+b。
2.超氧阴离子含量的计算
将ΔA 样品带入方程得到x 值(μmol/mL)
(1)按照样本质量计算
超氧阴离子含量(μmol/g)= x×V 样本÷(V 样本÷V 提取×W)=x÷W。
超氧阴离子产生速率(μmol/ g·min)= x×V 样本÷(V 样本÷V 提取×W)÷T=0.05x÷W。
(2)按照蛋白质浓度计算
超氧阴离子含量(μmol prot)= x×V 样本÷(V 样本×Cpr)=x÷Cpr。
超氧阴离子产生速率(μmol/ mg prot·min)= x×V 样本÷(V 样本×Cpr)÷T=0.05x÷Cpr。
(3) 血清或培养液
超氧阴离子含量(μmol/mL)= x
超氧阴离子产生速率(μmol/mL·min)= x÷T=0.05x。
V 样本:参与反应样本体积,0.2ml;V 提取:提取过程中加入的提取液体积,1mL;Cpr:样
本蛋白质浓度,mg/mL;W:样品质量,g;T:反应时间,20min。

 

超氧阴离子(OFR)含量检测试剂盒计算公式和产品说明!

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