超氧阴离子检测试剂盒计算公式和产品说明!

规格：50T/48S

产品内容：
提取液：液体100mL×1 瓶，4℃保存。
试剂一：液体32mL×1 瓶，4℃保存。
试剂二：液体25mL×1 瓶，4℃避光保存。
试剂三：液体25mL×1 瓶，4℃避光保存。
试剂四：lv仿，自备。
标准品：液体1mL×1 支，4℃保存。10μmol/mL 。

产品说明：
生物体内超氧阴离子等活性氧具有免疫和信号传导的作用，但积累过多时会对细胞膜及生物大
分子产生破坏作用，导致机体细胞和组织代谢异常，从而引起多种疾病。

超氧阴离子与盐酸羟胺反应生成NO2－，NO2－在对氨基苯磺酰胺和萘乙二胺盐酸盐的作用下，
生成红色的偶氮化合物，在530nm 有特征吸收峰，根据A530 值可以计算样品中O2－含量。

自备实验用品及仪器：
天平、水浴锅、离心机、可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿、lv仿和蒸馏水。

超氧阴离子检测试剂盒计算公式和产品说明!

操作步骤：
一、超氧阴离子提取
1. 植物、动物组织：称取约0.1g 样本，加入提取液1mL，充分研磨，12000rpm，4℃，离心20min，
取20μL 上清测定蛋白含量，其余上清作为待测样本。
2. 标准溶液的制备
取适量标准液，首先16 倍稀释至0.625μmol/mL，然后进行倍比稀释至0.3125、
0.15625、0.078、0.039、0.0195、0.009765、0.0049、0.00244、0.0012、0.0006umol/mL 梯度稀释
的标准溶液，用0.3125、0.15625、0.078、0.039、0.0195、0.009765、0.00244、0.0006umol/mL
标准管做标准曲线。
3. 血清或培养液：直接测定。

超氧阴离子含量计算公式
1.标准曲线的绘制
以ΔA 标准为y 轴，标准溶液浓度为x 轴，绘制标准曲线y=kx+b。
2.超氧阴离子含量的计算
将ΔA 样品带入方程得到x 值（μmol/mL）
（1）按照样本质量计算
超氧阴离子含量（μmol/g）= x×V 样本÷（V 样本÷V 提取×W）=x÷W。
超氧阴离子产生速率（μmol/ g·min）= x×V 样本÷（V 样本÷V 提取×W）÷T=0.05x÷W。
（2）按照蛋白质浓度计算
超氧阴离子含量（μmol prot）= x×V 样本÷（V 样本×Cpr）=x÷Cpr。
超氧阴离子产生速率（μmol/ mg prot·min）= x×V 样本÷（V 样本×Cpr）÷T=0.05x÷Cpr。
(3) 血清或培养液
超氧阴离子含量（μmol/mL）= x
超氧阴离子产生速率（μmol/mL·min）= x÷T=0.05x。
V 样本：参与反应样本体积，0.2ml；V 提取：提取过程中加入的提取液体积，1mL；Cpr：样
本蛋白质浓度，mg/mL；W：样品质量，g；T：反应时间，20min。
 

超氧阴离子(OFR)含量检测试剂盒计算公式和产品说明!