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罗丹明123溶液(0.5mg/ml)检测方法!
发布时间:2019-04-12   点击次数:427次

罗丹明123溶液(0.5mg/ml)检测方法!

 

Rhodamine 123是一种可以通过细胞膜的选择性染色活细胞线粒体的荧光染料,呈黄绿色荧光。广泛用作检测线粒体膜电位,也常用于细胞凋亡检测。它可以快速通过细胞膜,仅需几分钟就可以被具有活性的线粒体所俘获,并且对细胞没有任何毒性。

Rh123用于对许多种细胞进行染色,包括植物细胞和细菌。由于细胞内ATP的量与Rh123的荧光强度之间有相关性,因此Rh123被应用于检测细胞内的ATP。

规格:100ul
保存:4℃,避光,
有效期:12个月
用途:线粒体膜电位检测
说明:主要由罗丹明123、PBS组成,采用FACS检测,激发波长511nm,发射波长535nm。

 

染色程序:

(1) 将0.4mgRh123溶解到1mL DMSO中制备成1mMRh123-DMSO溶液。
(2) 用载玻片准备细胞。细胞数目应为5×104~5×105个/mL。
(3) 孵育该载玻片,用PBS或Hank's液洗涤细胞。
(4) 用培养基稀释1mM Rh123溶液以制备1~20µM Rh123缓冲液。
(5) 将Rh123缓冲液加入载玻片并在37℃下孵育30分钟至1小时。
(6) 去除Rh123缓冲液并用培养基洗涤细胞(洗涤细胞后为了固定,加入10%福尔马林缓冲液并孵育15~20分钟,接着用PBS洗涤)。
(7) 用带有荧光素滤光片的荧光显微镜观察细胞。

 

 

罗丹明123溶液(0.5mg/ml)检测方法!

 

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