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明胶酶谱法分析试剂盒再次获得山东大学齐鲁医院老师订购!
发布时间:2019-05-07   点击次数:244次

明胶酶谱法分析试剂盒再次获得山东大学齐鲁医院老师订购!

 

简介:

山东大学是中国近代高等教育的起源性大学。其主体是1901年创办的山东大学堂,是继京师大学堂之后中国创办的第二所国立大学,也是中国所按章程办学的大学;其医学学科起源于1864年,开启近代中国高等医学教育之先河。从诞生起,学校先后历经了山东大学堂、国立青岛大学、国立山东大学、山东大学以及由原山东大学、山东医科大学、山东工业大学三校合并组建的新山东大学等几个历史发展时期。

 

 

产品原理:

本试剂盒采用酶谱法(Zymography)检测MMP-2、MMP-9 活性。Zymography 是一种广为使用的、基于SDS-PAGE 电泳和反相凝胶染色的蛋白酶检测方法,其灵敏度可达1 nM,高于ELISA方法,其基本原理和程序是:制备加有胶原酶底物的SDS-PAGE 凝胶,含蛋白酶的样品在此凝胶中进行电泳,电泳结束后取出凝胶与酶反应Buffer 孵育,凝胶染色与脱色。凝胶中由于含底物蛋白而被深染,形成深色背景,但在有蛋白酶条带的位置,蛋白酶将降解凝胶中的底物蛋白,因而不被染色而形成透亮区域,从而能同时指示MMP-2、MMP-9 的大小位置(酶谱)及活性。本试剂盒提供MMP-2、MMP-9 特异蛋白底物及酶学反应缓冲液,可检测少至0.1~0.5 μl 血液中的MMP-2、MMP-9 酶谱及活性,检测灵敏度~1nM。试剂盒可进行50次标准小胶检测,如果小胶加样孔为10~15个,则总计可检测500~750个样品。

 

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染色步骤:

1. 此染色液即为工作液,使用时直接将聚丙烯酰胺凝胶放在培养皿中以考马斯亮蓝染色液覆盖凝
胶,并缓慢摇动2h;
2. 倾去染色液,用脱色液冲洗凝胶;
3. 以脱色液覆盖凝胶,缓慢摇动2h,倾去脱色液,再加入新脱色液进行脱色,直至获得清晰的蓝色的条带和干净的背景(通常此过程需要2~4h,也可脱色过夜至清晰的蓝色的条带和干净的背景);
4. 对凝胶进行分析和照相,凝胶可放置在7%的乙酸中保存。也可用凝胶干胶装置(P2000)对
凝胶进行处理后保存。

安全性:含有甲醇,无特殊毒性,按一般化学品操作规程处理

 

参考文献:

1. Nagase H and Woessner JF. Matrix Metalloproteinases. J Biol Chem, 1999, 274, 21491-21494

2. Heussen C, and Dowdle EB. Electrophoretic analysis of plasminogen activators in polyacrylamidegels containing sodium dodecyl sulfate and copolymerized substrates. Anal. Biochem,1980, 102,196–202

3.绿茶多酚EGCG增强动脉粥样硬化斑块稳定性及其相关机制研究

 

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