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Western blotting 蛋白Marker产品简介!
发布时间:2019-09-05   点击次数:2594次

Western blotting 蛋白Marker产品简介!

 

Western Blot Marker是专门为Western Blot试验设计的分子量标准。传统的Western Blot试验需要使用预染蛋白Marker来跟踪检测阳性抗原信号和转膜效率。

但预染蛋白Marker用在Western Blot试验中有三大缺点:

(1)预染蛋白Marker无法在胶片上曝光,曝光信号需要根据膜上的预染蛋白Marker来判断,因此后续的图片需要拼接才能两者合而为一;

(2)预染蛋白Marker都经过化学修饰,经过化学修饰的蛋白在SDS-PAGE电泳过程中迁移率发生改变,分子量信息不再准确,往往导致Western Blot结果判断出现较大偏差;

(3)预染蛋白Marker无法检测作为杂交过程的阳性对照。Western Blot Marker由7种不同分子量的蛋白组成(19、20、35、45、60、65、110 KDa),其中19 、45 、65KDa条带为蓝色预染marker,其它四个条带都可与人、小鼠、大鼠、山羊、绵羊、兔的IgG恒定区结合。

 

Western Blot Marker可以直接结合二抗,或通过结合一抗间接结合二抗,因此蛋白Marker就能与抗原在同一张胶片上曝出信号,阳性信号可以直接通过Western Blot Marker的位置来判断。另外,预染发光Western BlotMarker 还可作为Western Blot 试验的阳性对照。

 

使用说明:
1. 取出后于室温放置融化;
2. 温和地充分混匀,取 5μl 该 Western Blot Marker 至上样孔中,进行 SDS-PAGE 电泳。
3. 电泳完毕后转至 PVDF 膜或 NC 膜,与一抗二抗孵育。
4. 孵育完毕,将 Western Blot Marker 与抗原一起通过 ECL 曝光至胶片。

 

Western blotting 蛋白Marker注意事项 :
1. 本产品可直接使用,不需要加热。
2. 及时更换电泳缓冲液并使用新配制的凝胶,以免影响电泳结果。
3.  该产品与抗血清或高浓度多克隆抗体一起孵育时可能会出现非特异性条带,此时可降低该预染发光WesternBlot Marker 的上样量至1~2µl。

 

Western blotting 蛋白Marker产品简介!

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