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甲状腺素是细胞的产物,为灰白色针状结晶。Mp231-233℃(分解)。溶于氢氧化碱或碳酸碱溶液,不溶于水、乙醇和其他有机溶剂,但溶于无机酸或碱的乙醇溶液中。
[使用目的]
用于定量测定人血清(或血浆)中甲状腺素(T4)的浓度。
[用途]
甲状腺素(T4)和三石典甲状腺原氨酸(T3),二者均为酪氨酸的石典化物,由甲状腺分泌。其中 T4在外周脱石典后,约 2/5 转化为 T3(T3),3/5 转化为反 T3(r T3),这一过程是在肝内完成的。肝细胞的微粒体和胞浆膜内存在石典化甲状腺素脱石典酶,其中 5ˊ-脱石典酶催化 T4分解为高能的 T3, 5-脱石典酶催化 T4分解为无活性的 rT3。在肝细胞内,甲状腺激素分布于细胞核、线粒体、微粒体和可溶性成分中,在这些部分中其含量水平的高低变化依次为:可溶性成分﹥微粒体﹥线粒体﹥细胞核,且 T4﹥T3。肝脏是甲状腺素代谢、灭活的主要场所,也是甲状腺素结合蛋白的合成部位,该结合蛋白可与
血清蛋白竞争性摄取甲状腺素,是肝脏摄取甲状腺素的主要因素。血清中,甲状腺素绝大部分与蛋白质结合,仅极少部分呈游离型,游离型甲状腺素的多少与肝脏对甲状腺素的摄取量成正比。肝硬化时,甲状腺素的代谢将必然受到影响。定量测定总 T4含量,对评价甲状腺功能状态具有重要意义。
[实验方法]
1、将实验所需试剂及样本放置室温,平衡至少 30 分钟以上才可进行操作;
2、取 60X12mm 聚苯乙烯管进行编号,所有实验均做双管重复;
3、取每个浓度的标准品、质控血清和样本 50µl 加入相应编号的试管中;
4、每管均各加入 200µl 标记物工作液;
5、除去 T、NSB 管以外的各管均各加入 200µl 抗体工作液,充分混匀;
6、37℃温育 45 分钟;
7、每管均各加入 500µl 分离剂后,充分混匀;
8、室温放置 10~15 分钟后,离心 3500 转/分,20 分钟后,吸去或倾倒掉上清液;
9、用 γ-计数器测定各管放射性计数(CPM)。 推荐检测时间: 1 分钟
10、从标准曲线上读取样本及质控血清的浓度。
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