溶菌酶检测试剂盒检测原理



产品简介：
溶菌酶（lysozyme）又称胞壁质酶（muramidase）或N-乙酰胞壁质聚糖水解酶（N-acetylmuramide glycanohydrlase），是一种能水解致病菌中黏多糖的碱性酶。主要通过破坏细胞壁中的N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡糖之间的β-1,4糖苷键，使细胞壁不溶性黏多糖分解成可溶性糖肽，导致细胞壁破裂内容物逸出而使细菌溶解。溶菌酶还可与带负电荷的病毒蛋白直接结合，与DNA、RNA、脱辅基蛋白形成复盐，使病毒失活。因此，该酶具有抗菌、消炎、抗病毒等作用。

以蛋清为原料，在pH6.5条件下用弱酸性阳离子交换树脂732吸附后，再用硫酸铵洗脱，经透析后冷冻干燥得产品。
 

测定原理：

在一定浓度的混浊菌液中，由于溶菌酶能水解细菌细胞壁上肽聚糖使细菌裂解而浓度降低，透光度增强，故可以根据透光度变化来推测溶菌酶的含量。

操作步骤：

1、将配制好的应用菌液，标准应用液及所需检测的样本均放入37℃水浴箱中预温5分钟

以上。使菌液，标准液及检测样本的温度达到37℃。

2、将可见分光光度计于530nm处,1cm光径比色皿,以双蒸水调透光度100 (比色皿准备两只,一只用于调透光度100,一只用于测定)。

3、往相应编号的试管中加入0.2ml待测样本，取2ml应用菌液迅速冲入试管中，立即混匀并计时。(标准品应用液取0.2ml双蒸水,加入2ml应用菌液,其它操作与测定相同)

4、迅速倒入比色皿中在可见分光光度计530nm处比浊，5秒时读取透光度值T0, 比色皿不要取出，在2 分5秒时读取透光度值T2；

[注]：如5秒时来不及读数，可20秒时读取调透光度值T0,在2 分20秒时读取透光度值T2，标准管需同样操作。

5、求出2次透光度的差值（△T= T2-T0）。

[注]：用同一比色皿每检测一个样本后均要用双蒸水冲洗干净，才可再放第二个样本或标准品应用液。


优点：

1、溶菌酶是很稳定的蛋白质，有较强的抗热性。蛋清溶菌酶是C型，是已知的zui耐热的酶；

2、溶菌酶不会因为有机溶剂的处理而失活，当转移到水溶液中时，溶菌酶的活力可全部恢复；

3、溶菌酶可被冷冻或干燥处理，且活力稳定；

4、溶菌酶适宜pH5.3~6.4，可用于低酸性食品防腐；

5、溶菌酶生物试剂成本较低；

6、溶菌酶的抗菌谱较广，不仅局限于G- 菌，对部分G+菌也有抑制效果；

7、溶菌酶作为防腐剂安全性高。溶菌酶是一种天然蛋白质，1992年FAO/WTO 的食品添加剂协会已经认定溶菌酶在食品中应用是安全的。

溶菌酶检测试剂盒检测原理