信帆生物-酵母转化试剂盒酵母感受态细胞的制备

酵母感受态细胞的制备：

1.活化菌种。-80℃保存的菌种在固体YPDA培养基（YPDA加20g Agar/L）上划线，在30℃培养2-4天。

2.挑取酵母单菌落在固体YPDA培养基上划3-5 mm的duan线，在30 ℃培养2-4天。待酵母单菌落长至2 mm长时，接种。

3.首先把酵母细胞接种到3 ml液体YPDA培养基中，30℃过夜培养。

4.第二天转接到含有30 ml液体YPDA培养基的三角瓶中继续培养，待OD600到0.4-0.5范围内。收集细胞，1000 g，离心5 min, 去上清。

5.沉淀用30-50 ml的无菌的去离子水悬浮。1000 g，离心5 min，去上清。

6.沉淀用合适体积的100 mM LiAc悬浮（30 ml的酵母菌zui多用不超过1 ml的100 mM LiAc悬浮，通常100 μl的酵母细胞用于转化一个质粒，即一个反应）。

7.把酵母细胞的悬浮液分装到1.5 ml的离心管中，每管分装100 μl，用于转化一个质粒即一个反应。1000 g，离心5 min，去上清。制备好的感受态细胞备用。

注意事项：

1. 初次使用Carrier DNA，请把装有Carrier DNA的管子在沸水中煮沸5 min，然后立即放在冰上，用后放在-20℃储存备用。下次使用时请在冰上解冻Carrier DNA。

2. PEG溶液在低温环境下会析出，请于常温环境下*溶解后使用。

3. 转化全程要无菌操作。

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ELISA试剂盒：进口ELISA试剂盒,国产ELISA试剂盒,人elisa试剂盒，大鼠ELISA试剂盒，小鼠ELISA试剂盒等。
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