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真菌总RNA快速抽提试剂盒现货促销
发布时间:2020-10-28   点击次数:160次

真菌总RNA快速抽提试剂盒现货促销

 

概述

真菌菌丝经过液氮研磨后加入裂解液(Buffer Rlysis-F),迅速裂解细胞。再通过lv仿抽提、无水乙醇沉淀等步骤,可获得高浓度的 RNA。使用本试剂盒可从 30 mg 真菌中提取 3~5 μg 总 RNA,获得 RNA 的 OD260/OD280 比值一般为 2.0 左右,可直接用于 RT-PCR、Northern Blot、斑点杂交等实验。

 

特点
1.操作简单,全过程可在40分钟内完成。
2. RNA纯度高,不含DNA和多糖等杂质。
3. RNA得率高,完整性好。

 

标准抽提步骤

1. 取1ml Buffer Rlysis-F 加入1.5 ml RNase-free的离心管中备用。

2. 取50-100 mg新鲜真菌或20 mg干燥的子实体或菌丝用液氮研磨成粉末,加到上述1.5 ml离心管中,立即震荡混匀。液氮研磨过程中要避免样品融化,使用的研钵与药匙等工具应事先用液氮预冷。研磨后的样品应迅速加入裂解液中震荡混匀,避免 RNA 降解。样品转入离心管时避免带入液态氮,因为液氮在封闭的离心管中迅速转变成气体可能引起离心管的爆裂,请注意安全。如果使用液体培养基培养的真菌样品,可短暂离心弃掉培养基后再用液氮进行研磨。

3. 向裂解样品中加入200 µl lv仿,充分混匀。12,000 rpm 4°C离心5 min,取上清。

4. 加入1/3 体积无水乙醇,混匀,室温放置3 min,12,000 rpm 4°C离心5 min,小心倒掉上清。
离心后,在离心管底部,可能无肉眼可见的沉淀产生,属正常现象,请继续以下操作。

5. 用700 µl的75%乙醇(请用DEPC-treated ddH2O配制)洗涤沉淀,12,000 rpm 4°C离心3 min, 小心倒掉上清。

6. 重复步骤5一次。

7. 室温倒置10 min,尽可能使离心管中残留的乙醇彻底挥发。加入50 µl的DEPC-treated ddH2O溶解沉淀,立即使用或-70°C保存。

 

真菌总RNA快速抽提试剂盒现货促销

 

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