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抗酸染色液染色程度可通过时间或温度适当调整
发布时间:2021-03-19   点击次数:227次

抗酸染色液染色程度可通过时间或温度适当调整

 

抗酸染色用于细菌标本涂片或菌落涂片的染色。常用于对分枝杆菌属进行初步鉴别。普通细菌染色比较容易着色,而分支杆菌细胞壁含脂质较多,染色比较困难,必须加热才能被石炭酸复红着色。分枝杆菌菌体着色后,能抵抗盐酸酒精等酸性脱色剂的脱色,而其他细菌和细胞等均被脱色。当再用碱性美蓝复染后,分支杆菌仍为红色,其他细菌与背景呈蓝色。

 

1、 做一适当厚度的涂片,干燥后火焰固定。
2、 滴加抗酸染色液 A 于玻片上,覆盖住样本,在酒精灯上加热,切勿沸腾,出现蒸汽即暂时移开,必要时可续加染色剂以免干涸。加热 3-5 分钟。
3、 移开火,静置 5 分钟,待标本冷却后以自来水冲洗。
4、 用抗酸染色液 B 脱色(大约 1 分钟)至无红色染液脱出为止。完全脱色可避免产生假阳性结果。
5、 自来水缓慢冲洗后,滴加抗酸染色液 C 复染约 30 秒,水洗。
6、 待干后油镜观察

 

注意事项:
1. 染色程度可通过改变染色时间或染色温度做适当调整。
2. 每次试剂用完后,请迅速盖好,以免挥发。
3. 本产品有一定的刺激性和腐蚀性,使用时请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

在我们做生物医学实验或者某些物理化学实验时,为了更好地观察到实验效果,通常会选用合理的染色剂,在选择适当的染色剂后,我们就能够很好地观察到预期的实验现象或结果。染色剂依据来源可分为天然染色剂和人工合成染色剂,各种不同的实验选择不同的染色剂,同一种染色剂也可以用不同的配方进行调配制成。

天然染料
1、苏木精 苏木精是从南美的苏木(热带豆科植物)干枝中用乙醚浸制出来的一种色素,是常用的染料之一。苏木精不能直接染色,必须暴露在通气的地方,使他变成氧化苏木精(又叫苏木素)后才能使用,这叫做“成熟”。苏木精的“成熟”过程需时较长,配置后时间愈久,染色力愈强。被染材料必须经金属盐作媒剂作用后才有着色力。所以在配制苏木精染剂时都要用媒染剂。常用的媒染剂有硫酸铝铵、钾明矾和铁明矾等。
苏木精是淡黄色到锈紫色的结晶体,易溶于酒精,微溶于水和甘油,是染细胞核的优良材料,他能把细胞中不同的结构分化出各种不同的颜色。分化时组织所染的颜色因处理的情况而异,用酸性溶液(如盐酸—酒精)分化后呈红色,水洗后仍恢复青蓝色,用碱性溶液(如氨水)分化后呈蓝色,水洗后呈蓝黑色。
2、洋红 洋红又叫胭脂红或卡红。一种热带产的雌性胭脂虫干燥后,磨成粉末,提取出虫红,再用明矾处理,除去其中杂质,就制成洋红。单纯的洋红不能染色,要经酸性或碱性溶液溶解后才能染色。常用的酸性溶液有冰醋酸,碱性溶液有氨水、硼砂等。
洋红使细胞核的优良染料,染色的标本不易褪色。用作切片或组织块染都适宜,尤其适宜于小型材料的整体染色。用洋红配成的溶液染色后能保持几年。洋红溶液出现浑浊时要过滤后再用。

 

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