乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒哪种方法更简单
乳酸脱氢酶(LDH)存在于人体各组织器官中。LDH是机体能量代谢中的一种重要酶,LDH质与量的改变,直接影响到机体的能量代谢,当机体各组织器官病变时,其组织器官本身的LDH要发生改变,并且可引起血液中LDH改变。
LDH增高主要见于急性心肌梗塞、病毒性肝炎、肝硬化、肺梗塞、某些恶性肿瘤、骨骼肌病、有核红细胞骨髓内破坏(无效性造血)、白血病尤其是急性淋巴细胞型白血病、恶性贫血。
在具有尿毒症的慢性肾病患者,血清LDH一般正常,经透析治疗后活性上升,可能与血清中LDH的抑制剂尿素、草酸盐被除去有关。
产品简介:
LDH(EC 1.1.1.27)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是糖酵解途径的末端酶,催化丙酮酸与乳酸之间的可逆反应,伴随着 NAD+/NADH 之间互变。LDH 催化 NAD+氧化乳酸生成丙酮酸,丙酮酸进一步与 2, 4 - 二硝基苯肼作用生成丙酮酸二硝基苯腙,在碱性溶液中显棕红色,颜色深浅与丙酮酸浓度成正比。
试验中所需的仪器和试剂:
可见分光光度计、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
操作步骤:
一、样品测定的准备:
1. 细菌或培养细胞:收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清,按照细菌或细胞数量(10
4个):提取液体积(mL)为 500-1000:1 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,
功率 20%或 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次),8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
2. 组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5-10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液),进行冰浴匀浆;8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
3. 血清(浆)样品:直接检测。
产品优点如下:
1、快速简便:全程约40分钟。
2、取样量微:本法取样量10ul~50ul即可测LDH活力
3、稳定性好:试剂盒2~8℃存放3个月有效。
4、再现性好:变异系数CV=1.5%。
5、回收试验: X =101%。
6、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
7、测试面广:血清(浆)、组织、灌流液、培养细胞以及细胞培养液等
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