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秋水仙碱溶液使用方法
发布时间:2021-06-25   点击次数:93次

秋水仙碱溶液使用方法

 

秋水仙碱溶液生物学作用

用于中期核型分析(浓度较高)

抑制有丝,破坏纺锤体,使染色体停滞在 中期。

作用机理:秋水仙碱可与微管蛋白二聚体结合,阻止微管蛋白转换,使细胞停止于有丝 中期,从而导致细胞死亡。

时间:施放于前期,作用于中期。

用于诱变植物多倍体(浓度较低)

作用部位:常用于处理种子、茎生长点、幼芽、花芽、花粉粒和卵细胞等。

浓度:0.2%浓度的水溶液

处理时间:一天

 

秋水仙碱溶液作用机理

当细胞进行 时,一方面能使染色体的着丝点延迟 ,于是已复制的染色体两条单体分离,而着丝点仍连在一起,形成“X”形染色体图象(称为C-有丝,即秋水仙效应有丝);另一方面是引起中期的纺锤丝断裂,或抑制纺锤体的形成,结果到后期染色体不能移向两极,而重组成一个双倍性的细胞核。这时候,细胞加大而不 ,或者 成一个无细胞核的子细胞和一个有双倍性细胞核的子细胞。经过一个时期以后,这种染色体数目加倍了的细胞再 增长时,就构成了双倍性的细胞和组织。

注:1.秋水仙碱是诱变多倍体效果的药剂之一。

2.着丝点的分离与纺锤体无关,因为在用秋水仙碱处理,破坏微管的情况下,两条单体也可以分开。这是由于Ca离子的诱导,使着丝点分开后,再由纺锤体牵引移向两极,也就是说纺锤体只起牵引染色体的作用。此外,秋水仙素还有加快染色体运动,使染色体更快的到达两极的作用(浓度很低)。染色体的作用秋水仙碱能抑制有丝 ,破坏纺锤体,使染色体停滞在 中期。这种由秋水仙碱引起的不正常 ,称为秋水仙碱有丝 (C-mitosis)。在这样的有丝 中,染色体虽然纵裂,但细胞不 ,不能形成两个子细胞,因而使染色体加倍。自1937年美国学者布莱克斯利(A.F.Blakeslee)等,用秋水仙碱加倍曼陀罗等植物的染色体数获得成功以后,秋水仙碱就被广泛应用于细胞学、遗传学的研究和植物育种的工作中。例如,小麦与黑麦杂交,是不育的,用秋水仙碱处理,使染色体加倍,就能变成可育的异源八倍体小黑麦,在云贵高寒地区种植,产量和品质都比小麦和黑麦好。50年代日本用秋水仙碱处理一般甜菜得到了四倍体,后者与二倍体品种相间种植,从四倍体植株上收获到三倍体种子。推广种植三倍体甜菜,获得了很大的经济效益。

1951年,日本学者木原均,用同样方法培育成功三倍体无籽西瓜,秋水仙碱也起了重要作用。秋水仙碱使用时要小心。秋水仙碱是诱变多倍体效果的药剂之一。它的作用机理是:当细胞进行 时,一方面能使染色体的着丝点延迟 ,于是已复制的染色体两条单体分离,而着丝点仍连在一起,形成“X”形染色体图象(称为C-有丝 ,即秋水仙效应有丝 );另一方面是引起 中期的纺锤丝断裂,或抑制纺锤体的形成,结果到 后期染色体不能移向两极,而重组成一个双倍性的细胞核。这时候,细胞加大而不 ,或者 成一个无细胞核的子细胞和一个有双倍性细胞核的子细胞。经过一个时期以后,这种染色体数目加倍了的细胞再 增长时,就构成了双倍性的细胞和组织。

秋水仙碱不论是破坏还是抑制纺锤体的形成,作用都是一时的。秋水仙碱可以抑制纺锤体的形成,导致细胞不 ,——然后过一段时间秋水仙碱代谢掉,不再起作用,细胞继续 ,——然后才是“染色体数目加倍”(着丝点的 )。着丝点的分离与纺锤体无关,因为在用秋水仙碱处理,破坏微管的情况下,两条单体也可以分开。这是由于Ca离子的诱导,使着丝点分开后,再由纺锤体牵引移向两极,也就是说纺锤体只起牵引染色体的作用。

秋水仙碱之所以造成两个方面的应用,是在于他们在利用时,秋水仙浓度的不同。用于中期核型分析的浓度较高而用于产生双倍体或多倍体时浓度较低,并且当秋水仙碱浓度很低时,还能加快染色体运动,使染色体更快的到达两极!

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