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细胞铁离子试剂盒检测范围
发布时间:2022-03-10   点击次数:96次

细胞铁离子试剂盒检测范围


描述:铁是人体必需的元素之一,对人体的新陈代谢和身体健康具有重要作用,血液中铁的含量不足,就会造成缺铁性贫血。铁存在于人体所有的细胞内,各组织、器官包括各内分泌腺都含有铁。肝脏、脾脏和肺组织内含量较为丰富。成人体内含铁35克,大部分都以蛋白质复合物形式存在,极少部分以离子的形态存在。本试剂盒采用亚铁嗪比色法可以定量细胞铁离子,线性范围5~300uM。产品包括标准品和空白对照,本试剂盒可进行100个样品的检测。


规格:100T


储存:4℃保存 6个月有效


操作步骤:

1. 样品准备(以24孔板为例):

将含铁元素DMEM培养过的细胞用冷的PBS 2ml洗两遍,将PBS吸弃(若不马上检测可将其冻存于-20℃)。200ul/孔裂解液裂解细胞,置于摇床裂解2h

2. 标准品的稀释:用试剂盒提供的稀释用液将3mM 的标准品母液稀释为:300 uM150uM75uM37.5uM18.75uM9.38uM4.69uM。注意倍比稀释并设置0浓度对照反应管。

3. 将缓冲液与4.5%KMo4溶液按1:1混匀,称为混液A

5. 混匀,60℃ 孵育1h

6. 冷却至室温,将管盖与管壁上的液滴离心入管底。

7. 加入30ul 铁离子检测剂,混匀,室温孵育,30min

8. 200ul 96孔板,在550nm测定吸光度。如果不能测定550nm,也可以在540nm~580nm范围内检测。

9. 绘制标准曲线并计算铁离子浓度。


说明:

1. 本试剂盒不受锰离子、镁离子、镍离子和锌离子等的干扰。
2. 操作过程中,样品与试剂等避免与铁器接触,以防污染。

3. 所测样本的值高于标准曲线的上限,应稀释样品后重新测定。

4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作,检测试剂有腐蚀性,请小心操作,若不慎沾到皮肤上请马上用清水冲洗干净。

5. 该试剂盒仅供科学研究使用。




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