细胞活力(活死细胞染色)检测试剂盒适用于哪些实验

细胞活力(活死细胞染色)检测试剂盒(Calcein AM,PI法，适用于FACS、FM) 通过同时检测细胞内酯酶活性和质膜完整性，提供一种判断细胞活力的荧光染色方法。

本试剂盒内含有两种染料：钙黄绿素-AM (Calcein-AM) 和碘化丙啶 (PI)，Calcein-AM可透过活细胞膜，通过活细胞内的酯酶作用由几乎无荧光的Calcein-AM脱去AM基团生成具有强烈荧光信号的绿色荧光物质Calcein（Ex/Em：495nm/515nm），因此活细胞可被检测到绿色荧光。另一方面PI不能透过活细胞的细胞膜，但当细胞膜受损时PI可进入到死细胞内并与核酸结合，产生明亮的红色荧光（Ex/Em：535nm/617nm），因此死细胞会被检测到红色荧光。用490nm激发时可用荧光显微镜同时观察活细胞和死细胞；而用545nm激发时仅可观察到死细胞。

本试剂盒适用于荧光显微镜、流式细胞仪、荧光酶标仪等荧光检测系统。本试剂盒可以应用于大多数的真核哺乳动物细胞，但不适用于细菌和真菌。

产品应用实测：

细胞：Hela；

凋亡处理：Apoptosis Activator 2

检测工作浓度：2 µM calcein AM, 8 µM PI；

孵育时间：40 min；

检测条件：荧光显微镜，200×。

结果：活细胞细胞质成绿色荧光，死细胞细胞核呈红色荧光，颜色鲜明。

注意事项：

1. 本试剂盒中的Calcein-AM Solution和PI Solution量很少，有可能会粘在盖子或管壁上，开封前请先适当离心至管底。

2. 由于Calcein-AM储存液对湿度非常敏感，请在每次使用后紧紧密封Calcein-AM储存液的盖子。如果不能一次用完，建议根据单次用量分装密封保存。例如分装成10μl/管，用封口膜封口，并用铝箔纸包裹，放在一个密闭性能好的塑料袋中，并放入一包干燥剂，在-20℃密封避光保存。

3. 染色工作液必须现配现用，配制好的工作液请在当天使用。

4. 荧光染料均存在淬灭问题，保存和使用本试剂盒的过程中请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。建议染色后尽量当天完成检测。

5. 碘化丙啶对人体有刺激性，操作时请小心，并注意适当防护以避免直接接触人体或吸入体内。

6. 为了您的安全和健康，操作时请穿着实验服并佩戴一次性手套。