2022产品更新-Poly(A)聚合酶
更新时间：2022-12-27 点击次数：243次
2022产品更新-Poly(A)聚合酶
描述：本E. coli Poly(A) Polymerase 为高效加A 聚合酶，该酶以RNA为模板在RNA的3′末端加入20~200 个A碱基。可应用于增强mRNA 的稳定性，及microRNA 加A 尾，为cDNA 合成提供oligo-dT 引物结合位点等。该酶以单链RNA作为引物，ATP 作为底物进行聚合反应。
操作方法：
1. 按以下组分配制反应体系
E. coli Poly(A) Polymerase(5U/μl) 1 μl
10×EPAP Reaction Buffer 2 μl
10 mM ATP 2 μl
25 mM MnCl2 2 μl
RNA 0.5~10 μg
ddH2O Up to 20 μl
2. 混合均匀后，37°C 反应1 小时。即可用于后续实验。
注：不同的实验需要加A 的量会有所不同，可通过减少反应时间来调整加A 的长度，该酶在37°C 反应30 分钟时可加30 个A 碱基，1 小时可加100 个A 碱基。
活性定义：
在37℃、pH7.9 的条件下，以ATP 为底物，10 分钟内把1 nmol 的AMP 聚合到RNA 上所需要的酶量定义为1 个活性单位（U）。
应用：
♦ RNA 3' 标记
♦ microRNA 加A 尾，为cDNA 合成提供oligo-dT 引物结
合位点
♦ 增强RNA 稳定性
储存：
-20°C 可保存2 年。
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