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细胞铁离子试剂盒的检测范围
更新时间:2023-03-31   点击次数:278次

细胞铁离子试剂盒检测方法

 

描述:铁是人体必需的元素之一,对人体的新陈代谢和身体健康具有重要作用,血液中铁的含量不足,就会造成缺铁性贫血。铁存在于人体所有的细胞内,各组织、器官包括各内分泌腺都含有铁。肝脏、脾脏和肺组织内含量较为丰富。成人体内含铁 3~5 克,大部分都以蛋白质复合物形式存在,少部分以离子的形态存在。本试剂盒采用亚铁嗪比色法可以定量细胞铁离子,线性范围 5~300uM。产品包括标准品和空白对照,本试剂盒可进行 100 个样品

的检测。


铁离子比色法检测试剂盒-20221019.jpg

 

原理:

铁与蛋白结合成复合物,在酸性介质中铁从复合物中解离出来,再被还原剂还原成二价铁,并与亚铁嗪生成紫红色化合物,在 540-580nm 处可比色测定。

 

适用范围:该试剂盒可用于培养细胞中铁离子定量检测。

用户自备:4.5%KM溶液 5ml。

 

操作步骤:

1. 样品准备(以 24 孔板为例):将含铁元素 DMEM 培养过的细胞用冷的 PBS 2ml 洗两遍,将 PBS 吸弃(若不马上检测可将其冻存于-20℃)。200ul/孔裂解液裂解细胞,置于摇床裂解 2h。

2. 标准品的稀释:用试剂盒提供的稀释用液将 3mM 的标准品母液稀释为:300 uM、150uM、75uM、37.5uM、18.75uM、9.38uM、4.69uM。注意倍比稀释并设置 0 浓度对照反应管。

3. 将缓冲液与 4.5%高KM溶液按 1:1 混匀,称为混液 A。

4. 参考下表使用 1.5ml 离心管,设置空白对照管、标准品管和样品管。如果样品中的铁元素含量过高,用裂解液适当稀释后再进行测定。

 

说明:

1. 本试剂盒不受锰离子、镁离子、镍离子和锌离子等的干扰。

2. 操作过程中,样品与试剂等避免与铁器接触,以防污染。

3. 所测样本的值高于标准曲线的上限,应稀释样品后重新测定。

4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作,检测试剂有腐蚀性,请小心操

作,若不慎沾到皮肤上请马上用清水冲洗干净。

5. 该试剂盒仅供科学研究使用

 

 


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