新闻中心您的位置:网站首页 >新闻中心 >科研细胞-RTS Arctic(DE3)感受态细胞
科研细胞-RTS Arctic(DE3)感受态细胞
更新时间:2023-05-16   点击次数:248次

科研细胞-RTS Arctic(DE3)感受态细胞


RTS(Room Temperature Stable)系列感受态细胞为独有的化学感受态专利技术制备,其室温可保存3天、-20°C可保存2年(推荐保存温度)、-80°C可长期保存性能无下降。运输过程中无需干冰,可常规冰袋运输(推荐运输温度)。RTS表达感受态细胞均为热激感受态细胞,转用于蛋白表达(不可用于克隆和载体构建),经42°C热激1min可获得105~106cfu/μg效价,可满足质粒转化要求。该制品使用简单、运输、储存方便。


储存

RTS系列感受态为干粉形式,均可室温保存3天,长期保存-20°C(2年)。经Nano E.coli Transfection Reagent溶解后的感受态必须分装后,并于-60°C以下保存。溶解后的感受态细胞避免反复冻融,在-60°C以下可保存6个月。


使用方法

1. 从-20°C冰箱中取出Nano E.coli Transfection Reagent彻底融化,放置于冰上。

注意:该试剂含长链带电化合物,允许反复冻融20次,使用完毕后继续-20°C保存。

2. 取50 μl Nano E.coli Transfection Reagent置于0.2 ml EP管中,加入10~100 ng质粒DNA(不可使用连接产物),枪头吹打混合均匀,冰上放置2min。

注意:放置时间不要超过30min,过长时间会导致核酸聚合,从而影响转化效价。

3. 将上述混合物(50 μl Nano E.coli Transfection Reagent和质粒DNA)加入到一支RTS表达感受态细胞干粉中,枪头轻轻吹打,彻底溶解细胞干粉,置于冰上15min。

注意:使用RTS 表达感受态细胞干粉前,轻甩干粉至管底部,如果发现干粉已经溶解则不可使用。

4. 置于42°C热激1min后,迅速置于冰上急冷2min。

5. 将热激完毕的感受态细胞转移到含有450 μl不含抗生素的SOC(或LB)培养基,37°C振荡(225 rpm)培养60min。使质粒上抗性标记基因表达,菌体复苏。

6. 取200 μl复苏菌液涂布到含相应抗生素的LB琼脂平板表面。

7. 将平板置于37°C培养,12~18小时后可出现菌落。

8. 获得的表达菌,可使用IPTG进行诱导表达,从而获得重组蛋白。



 


网站首页 关于我们 新闻中心 产品中心 联系我们
备案号:苏ICP备16008122号-3   GoogleSitemap   技术支持:环保在线 管理登陆
© 2018 南京信帆生物技术有限公司(www.njxfbio.com) 版权所有 总访问量:487088