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脂质体基因转染试剂(可取代Lipo2000)
更新时间:2024-07-01   点击次数:167次
脂质体基因转染试剂(可取代Lipo2000)
 
产品描述
脂质体基因转染试剂是一种新型的阳离子脂质体转染试剂,可替代Lipo2000,且与Lipo2000比其毒性更低,转染效率更高。

本产品适合于将核酸(DNA和RNA)转染入真核细胞,具有低细胞毒性;对多种类型的细胞和培养板都具有高转染效率;转染时血清的存在不影响转染效率的优点。

本产品适用范围:贴壁细胞和悬浮细胞(哺乳动物细胞系)的转染。


产品优势
1. 脂质体基因转染试剂转染效率高,可替代Lipo2000,重复性好,操作简单。
2. 无明显细胞毒性,抗血清干扰,用脂质体基因转染试剂转染细胞后,对于大多数细胞,72小时内不更换培养液无明显细胞毒性。使用脂质体基因转染试剂血清的存在不影响转染效率,这样可以减少去除血清对细胞的损伤。
3.脂质体基因转染试剂适用范围广,适用于核酸(DNA和RNA)在多种类型细胞和培养器皿上的转染。

实验数据
为了更明显看出转染效率的差异,选择DNA:转染试剂相对较少的极限情况,分别用脂质体基因转染试剂与进口T公司Lipo2000在293(常用的转染细胞)和786-0(细胞状态相对较差)两种细胞上转染pLJM1-EGFP质粒,24h或48h后用荧光显微镜观察绿色荧光表达情况,判断转染效率。


结论:
1.脂质体基因转染试剂在这两种细胞上,表达绿色荧光蛋白的细胞比例均比进口T公司Lipo2000高,说明其转染效率稍好于进口T公司Lipo2000。
2.转染后6小时不换液(即不去除转染试剂)与换液(即去除转染试剂)相比,表达荧光蛋白细胞的数量并没有减少,转染效率并没有降低,且不换液时与进口T公司Lipo2000相比,脂质体基因转染试剂蛋白表达量更高,说明其细胞毒性更低。
3.在细胞状态不好和DNA含量较低的极限情况下,脂质体基因转染试剂仍能使细胞表达一定量的荧光蛋白,说明其抗干扰能力和稳定性强。

保存条件

2-4℃保存,有效期一年,避免冷冻。


注意事项
1.质粒DNA转染的优化:为达到最高的转染效率和降低细胞毒性的影响,可以对DNA和转染试剂的比例以及细胞密度进行优化,一般在1:0.5 ~ 1:5的范围内优化DNA (µg) 和 Lip2000 (µl) 的比例。
2.通常DNA-转染试剂复合物和细胞一起孵育6小时已经足够产生较高的转染效率。大多数细胞在本产品转染后长达72小时未见明显细胞毒性。但转染后6小时更换新鲜培养基对于一些生长非常迅速的细胞有助于提高转染效率;对于一些易于转染的细胞如HEK293T细胞,换液可视细胞生长状况而定,无需为提高转染效率而换液。
3.使用高纯度的DNA(A260/280比值越接近1.8越好)有助于获得较高的转染效率。
4.转染前细胞需处于良好的生长状态。
5.本产品在不同细胞上的转染效率不同,转染试剂的添加量需要摸索,具体请参考附表2和附表3。
6.本产品为无菌包装,无需过滤,请注意无菌取用。
为了您的安全和健康,操作时请穿着实验服并佩戴一次性手套。
 

 


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