爱先蓝-糖原(AB-PAS)染液的储存条件
(AB-PAS Stain)
染色原理
中性粘液物质含有氨基己糖基,酸性粘液物质也含有氨基己糖,并含有各种酸根。前者多见于冒粘膜的表面上皮,十二指肠肠腺、领下腺和前列腺上皮等:后者多见于呼吸道和消化道的杯状细胞、主动脉壁、软骨基质、角膜和皮肤等。胃粘膜表面上皮分泌中性粘液,而胃的肠腺化生或肠型胃癌细胞分泌酸性粘液,但胃型胃癌的癌细胞则分泌中性粘液。这二种粘液在苏木素-伊红染色时较难区分,而用(AB-PAS)染色时酸性粘液可被爱先蓝染为蓝色,中性粘液则可被 PAS染为红色。
试剂组成
储存条件及有效期
室温密封保存,有效期为 12 个月。试剂二和试剂三应用液若本次实验未用完,需-20C冰
箱冷冻避光保存。下次实验临用前,需平衡到室温再使用。
样本处理
石蜡切片
脱蜡:石蜡切片在脱蜡剂中脱蜡 2 次(最好在 37C气浴箱中进行),每次 10~15 分钟。(本
所有无毒环保拖拉机供应)
梯度入水: 95%、70%、30%乙醇各2 分钟,蒸馏水2 分钟
染色步骤
玻片法:
1.蒸馏水稍洗样本,滴加爱先蓝染液染色 10~20 分钟,水洗 30 秒左右;
2.将高碘酸染液滴加在玻片的样本上,使其全部覆盖样本,将此玻片轻轻平放于染色架上,
室温孵育 10 分钟。
3. 取出染色玻片,蒸馏水洗玻片2~3 分钟。
4.玻片未完全干透前,滴加雪夫试剂于玻片样本上,用洗耳球将染液吹匀并全部覆盖样本,
室温孵育 3~5 分钟
5. 孵育结束后,取出染色玻片,自来水流水缓慢冲洗玻片 5 分钟
6. 滴加苏木素染色 20~30 秒,流水冲净,待干后镜检。建议封片后观察.
染缸法:
1.蒸馏水稍洗样本,将玻片放入爱先蓝染液的染缸中染色 10~20 分钟,水洗 30 秒左右;
2.将玻片放入装有高碘酸的染缸中,室温孵育 10 分钟。
3.取出染色玻片,蒸馏水洗玻片 2~3 分钟。
4.玻片未完全干透前,将玻片放入装有雪夫试剂的染缸中,室温孵育 3~5分钟。
5.孵育结束后,取出染色玻片,自来水流水缓慢冲洗玻片 5 分钟。
6.放入装有苏木素染液的染缸中染色 20~30 秒,流水冲净,待干后镜检。建议封片后观察。
染色结果
酸性粘液物质呈蓝色,中性粘液物质呈红色,混合粘液物质呈紫红色,细胞核呈浅蓝色
爱先蓝-糖原(AB-PAS)染液的储存条件
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