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免疫组化实验应该如何分析
更新时间:2023-11-22   点击次数:116次

 □面密度,累积光密度值(IOD)/待测区域组织面积:累积光密度值是所有阳性信号光密度的积分,除以待测区域组织面积可反映阳性多少和深浅,成正比。优点是既考虑了阳性的面积以及阳性的深浅,且不受待测组织大小的影响。

□阳性率,阳性细胞数/总细胞数分析阳性细胞数占总细胞数的占比。反映阳性细胞数量比率高低,成正比。优点适用于细胞类型较单一的情况。比如肿瘤组织中KI67指标肿瘤细胞增值比率,脾脏组织内CD3指标T细胞比率等。

□阳性细胞密度,阳性细胞数/待测区域组织面积分析阳性细胞数占待测区域组织面积之比。反映单位面积内阳性细胞个数,成正比。优点不受多种细胞类型数量影响。常用在浸润型的炎性细胞中,比如肝组织中某类炎性细胞占比,代表性指标MPO、CD68等。

阳性强度,各阳性点颜色深浅的平均值:反应整张片子或者某个区域阳性的平均深浅度。明场为平均光密度(average optical density),暗场为平均强度(average intensity),数值越大阳性程度越强。适用性广,由于没有考虑阳性面积,在极端情况下会出现,阳性极少且颜色深时阳性强度值高,阳性点多且颜色浅时阳性强度值低。可以结合阳性面积一起评价。

□阳性面积比,阳性面积/待测区域组织面积:不考虑阳性深浅的变化,单纯的比较阳性面积占比。

MVD,微血管数量/视野:单位面积内微血管数量,对于微血管的识别不需具备完整的管腔和红细胞,只要有明显的血管内皮细胞染色、并且能与相邻的血管、实质细胞以及间质成分相分隔的,就可视为一个独立的血管,分辨不清、管腔直径>8个红细胞直径的血管以及具有较厚肌层的血管不纳入计数内。常用指标CD31、CD34。此项只能分析高倍视野的图片。

IRS评分:对免疫组化切片中的染色程度(0-3分)以及阳性率(0-4分)分别评分后相乘得到综合评分(0-12分)。具体如下,染色强度以目的细胞呈现染色特性计分:无着色为0分,淡黄色为1分,棕黄色为2分,棕褐色为3分;以细胞阳性比率进行计分:0~5%为0分,6%~25%为1分,26%~50%为2分,51%~75%为3分,>75%为4分。综合评分可划分阳性高低后进行统计,常用于癌和癌旁的芯片生存分析中。

H-Score:即 Histochemistry score (组织化学评分)的缩写,是处理免疫组化的一种组织学评分方法,将每张切片内阳性数量及其染色强度转化为相应的数值,达到对组织染色半定量的目的。H-Score(H-SCORE=∑(pi×i)=(percentage of weak intensity×1)+(percentage of moderate intensity×2)+(percentage of strong intensity×3),式中pi表示阳性信号像素面积/细胞数量占比;i代表着色强度)。H-score为0-300之间的数据,数据越大说明综合阳性强度越强。


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