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肝素亲和填料使用说明
更新时间:2024-04-30   点击次数:54次

肝素亲和填料使用说明

Heparin NUPharose FF和 Heparin NUPharose HP是肝素亲和填料, 是经典的琼脂糖凝胶层析介质基球 NUPharose上键合 肝素 而成。 FF为 Fast Flow的缩写,具备快流速的特点,可用于快速纯化蛋白质,适用性广,易于放大。 HP为 High Performance的缩写,具备分辨率高的特点。 肝素亲和的原理较为复杂, 一般认为 肝素与蛋白的结合是离子相互作用、氢键与 范德华力 等多种驱动力共同作用的结果。 肝素填料 主要用于凝-血酶 III、凝血-因子、脂蛋白、酯酶、激素、干扰素等的分离纯化。 也有 文献报道将肝素填料用于外泌体的纯化。产品留了琼脂糖极-好的亲 水性及大网架结构,与生物活性大分子有很好的相容性,具有载量高,非特异性吸附少,流速快等特点, 适用于各种肝素亲和层析。

使用方法 参考

1、色谱柱装填

以下阐述与层析系统连接时,填料的色谱柱装填方法。

1 所有需要用到的材料的温度要与色谱操作的温度一样,液体最好做脱气处理。

2)填料 用量计算: 通过沉降定量填料体积, 需要的沉降 填料 体积 =柱体积× 压缩比(也称压缩因子) 。 沉降体积是指填料在 20%乙醇保存液中自然沉降 完-全 读取的稳定体积。 Heparin NUPharose FF的压缩比为 ~1.15 Heparin NUPharose HP的压缩比为 ~1.20。为使达到装柱比,可通过柱头下压的方法,也可以通过高流速 压柱。

3)填料 清洗: 将 填料 悬液充分摇匀后量取 相应体积, 抽去液体,并用约 3倍填料体积的 纯化水洗涤,重复 3次 ,以除去保存液 。

4)装柱 填料 悬液准备:将 填料 转移 到 适当的容器中,加


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