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白细胞稀释液(计数液)使用步骤
更新时间:2024-04-30   点击次数:55次

白细胞稀释液(计数液)使用步骤

产品简介:

白细胞(White Blood Cell,WBC)是血液中的一种常见的免疫细胞。

白细胞稀释液(WBC Dilution)主要由乙酸、亚-甲蓝等组成,主要用于白细胞计数,但并不能区分不同种类的白细胞,作用原理是血液经白细胞稀释液稀释后成熟红细胞全部被溶解,充入计数池后显微镜下计数一定体积内白细胞数,换算求出每升血液中白细胞的数量。该试剂仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。

 

自备材料:

1、新鲜全血、微量吸管、血球计数板、血盖片、显微镜、小号试管

 

操作步骤(仅供参考):

1、取小号试管,加 WBC Dilution 0.38ml。

2、用洁净干燥微量吸管取末梢血 20μl,擦去管外余血后加至 WBC Dilution 底部,轻轻将血放出,再轻吸上层清液清洗吸管 2~3 次,立即混匀,稀释比例为1:20,也可以按照 1:10 或 1:40 的比例稀释。

3、待红细胞完-全破坏,液体变为棕褐色后,再次混匀后充池,注意产生气泡或外溢,室温静置 2~3min,待白细胞沉淀。

4、置于显微镜低倍镜下依次计数四角和 4 个大方格内的白细胞数,压线细胞按“数上不数下,数左不数右"的原则进行计数。

 

计算:白细胞数/L=(N÷4)×10×20×106=(N÷20)×109

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注意事项:

1、采血时不能过于挤压,针刺深度应适当。

2、小试管、计数板均应清洁,以免误认细胞。

3、在参考范围内大方格间的细胞数不应相差 8 个以上,两次重复计数相差不应超过10%4、白细胞数量过多时可加大稀释倍数,白细胞数量过少时可计数 个大方格的白细胞数或大量取血。

5白细胞稀释液仅可计数白细胞,并不能区分不同种类的白细胞,如需区分白细胞应选用瑞氏染色液或者瑞氏-姬姆萨复合染色液。

6、试剂开封后请尽快使用,以防影响后续实验效果。

7、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。



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