新闻中心您的位置:网站首页 >新闻中心 >人胰高血糖素样肽1 ELISA试剂盒配置需要注意哪些问题!
人胰高血糖素样肽1 ELISA试剂盒配置需要注意哪些问题!
发布时间:2018-10-24   点击次数:758次

人胰高血糖素样肽1 ELISA试剂盒配置需要注意哪些问题!

 

该类药物目前开发进展迅速的是美国Amylin制药公司合成的GLP-1受体激动剂Exenatide(含39个氨基酸的多肽)。Amylin制药公司于2003年11月公布了Exe-natide治疗2型糖尿病的3个关键性Ⅲ期试验结果,都达到了糖尿病治疗终点。高剂量组(10微克,每天3次)可使患者体重平均减轻2千克,与对照组相比有显著性意义。2005年4月FDA已批准Exenatide用于2型糖尿病的治疗。

 

实验准备:

在收集样本前都必须有一个完整的计划,必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天就进行检测的样本,及时储存在4℃备用。对于隔天再检测的样本,及时分装后冻存在-20℃备用,有条件的,需要-70℃冻存备用。标本应避免反复冻融。
液体类标本: 包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。
5.培养细胞:检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
6.组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂,用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
7.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.
8.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

 

注意事项:

1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未 用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间要控制在 5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,需要做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本 OD 值 大于标准品孔孔的 OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计 算时请后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。

 

人胰高血糖素样肽1 ELISA试剂盒配置需要注意哪些问题!

 

 

网站首页 关于我们 新闻中心 产品中心 联系我们
备案号:苏ICP备16008122号-3   GoogleSitemap   技术支持:环保在线 管理登陆
© 2018 南京信帆生物技术有限公司(www.njxfbio.com) 版权所有 总访问量:225207
    QQ在线客服
  •   在线咨询
  • 点击这里给我发消息
电话
025-66060117
手机
17551010836