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SDS-PAGE凝胶配制试剂盒试剂使用量
发布时间:2021-05-26   点击次数:108次

SDS-PAGE凝胶配制试剂盒试剂使用量

 

描述:本产品提供了配制SDS-PAGE凝胶所需的各种试剂,用户只需自备制胶器具和蒸馏水,即可配制高质量的各种浓度的变性PAGE胶,方便,快捷。本试剂盒至少可以配制30块常规大小的PAGE胶,并且其中的分离胶缓冲液和浓缩胶缓冲液中已加入10%SDS,使用时无需另外加入。

 

灌制浓缩胶(试剂使用量参考附表3)

(1)去除覆盖在分离胶上的水层,并用滤纸吸干,水份吸不干,可能会导致浓缩胶和分离胶分开。

(2)将不同体积的30%Acr-Bis(29:1)、分离胶缓冲液和双蒸水在小烧杯中混合。

(3)加入10%APS和TEMED,轻轻搅拌混匀,避免产生气泡。

(4)将浓缩胶溶液加至分离胶的上面,插入样品梳,避免产生气泡,静置20-30min,直至浓缩胶聚合。

(5)待凝胶聚合后,小心拔下梳子,以免破坏加样孔。

(6)进行常规电泳。

注意事项:

1.10%APS配置好后,应当-20℃保存,并且应尽量减少室温存放时间,以防失效。

2.TEMED易挥发,使用后请拧紧瓶盖。

3.凝胶凝聚的速度与温度等关系密切,可通过调节APS和TEMED的用量,控制凝胶的聚合速度,凝胶聚合过快不利于操作。

4.丙烯酰胺,TEMED等有毒,操作时请穿实验服并戴手套。

5.在凝胶配制过程中,应尽量避免产生气泡。

6.在分离胶上层加蒸馏水时要小心操作,加水时速度不宜过快。

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