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葡聚糖凝胶系列产品操作方法快收藏
发布时间:2021-06-30   点击次数:92次

葡聚糖凝胶系列产品操作方法快收藏

 

葡聚糖凝胶是一种珠状的凝胶,含有大量的羟基,很容易在水中和电解质溶液中溶胀。亲水基质使其非特异性吸附最小化,并在生物分子分离期间得到较高的回收率。G 型的葡聚糖凝胶有各种不同的交联度,因此它们的溶胀度和分级分离范围也有所不同。葡聚糖凝胶的溶胀度基本上不因盐和洗涤剂的存在而受影响。

使用方法
Sephadex 系列产品以干粉形式存在,使用前必须溶胀,在膨胀期间应避免过度搅拌,因为它可能破坏填料,不要使用磁力搅拌器。

1、填料的准备
(1)将填料在过量去离子水或缓冲液中,室温条件下膨胀 24 小时,或用热水膨胀 1 小时。洗脱缓冲液不应含有高粘度的试剂。溶胀过程中,如果上层有漂浮物,请去除。
(2)将溶胀好的填料,所有的缓冲液等材料平衡至实验操作温度,对所有的缓冲液进行脱气处理。

2、装柱
(1)检查层析柱所有部件,特别是过滤网,密封圈,螺旋塞是否紧密,玻璃管是否干净和完整。
(2)将柱内及柱子底端用水或缓冲液润湿并保持一小段液位,务必使底端无气泡。
(3)用玻璃棒引导匀浆沿着柱内壁一次性倒入柱内,注意勿使产生气泡。打开柱子出液口,使凝胶在柱内自由沉降,连结好柱子顶端柱头。
(4)打开蠕动泵,让缓冲液用使用时流速的 1.33 倍的流速流过,使柱床稳定(注意压力不要超过填 料最大耐压)。 

注意事项: 
(1)上样之前,样品必须经过膜过滤及去除色素,否则杂质及色素会被吸附到填料上,影响填料的 正常使用。所有的缓冲液均需要用 0.45um 的过滤器过滤。 
(2)在使用过程中,避免使用高浓度的强酸强碱,酸和碱的浓度应低于 0.1 摩尔。碱会使流速变慢。 

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