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α-淀粉-酶水溶液(1%)操作步骤
发布时间:2022-11-03   点击次数:43次

α-淀粉-酶水溶液(1%)操作步骤


简介:

糖原染色是病理学中常规的染色方法之一,其原理是过碘酸能使细胞内乙二醇基氧化成二醛,醛基与雪夫氏溶液起反应,使无色品红结合成红色反应,沉着含糖原的细胞结构上,标本上所能显红色的糖类主要为多糖包括糖原、糖蛋白、粘多糖和糖脂等。该法常用来显示糖原和其他多糖,该染色试剂盒不仅能够显示糖原,还能显示中性黏液性物质和某些酸性物质以及软骨、垂体、霉菌、真菌、色素、淀粉样物质、基底膜等。


PAS技术是可检测不同种类的黏液物质(如糖原、黏蛋白和糖蛋白)的方法,但PAS技术却不能区别黏蛋白和糖原。PAS染色实验原理是胞浆内存在糖原或多糖类物质(如粘多糖、粘蛋白、糖蛋白、糖脂等)中的乙二醇基(CHOH-CHOH)经过碘酸(periodicacid)氧化,转变为二醛基(CHO-CHO),与雪夫(Schiff)试剂中的无色品红结合,形成紫红色染料而沉积于细胞内多糖所在处。该反应称为过碘酸-雪夫(PAS)阳性反应,以前也称为糖原染色。


α-淀粉-酶水溶液(1%)由α-淀粉-酶、磷酸盐组成,其pH在5.3左右,主要用于糖原PAS染色之前切片处理。糖原消化时需要两张相同的切片,脱蜡后一张切片用α-淀粉-酶水溶液(1%)处理,另一张仅用PBS或蒸馏水处理,然后两张切片均用PAS法染色,消化后染色消失表明存在糖原。主要用于消化淀粉,鉴别黏液物质(如黏蛋白和糖原)。该产品仅用于科研实验,不可用作他用。


操作步骤(仅供参考):

1、 两张相同切片,二甲苯脱蜡,梯度乙醇入水。

2、 一张切片入37℃淀粉-酶溶液处理1 h。另一张不用淀粉-酶溶液处理,入水中1h作为对照。

3、 流水冲洗两张切片各。

4、 进行糖原PAS染色步骤


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