人肾损伤因子1（Kim-1）检测试剂盒

人肾损伤因子1（Kim-1）检测试剂盒

产品名称：人肾损伤因子1（Kim-1）检测试剂盒

英文名称：Human Kim-1 ELISA Kit

产品货号：XFH12519

规格：48T/96T

储存条件：2-8℃

有效期：6个月

检测原理：

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被人肾损伤因子1（Kim-1）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人肾损伤因子1（Kim-1）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

样品收集、处理及保存方法：

以下只是列出样品采集的一般指南。所有样本采集过程中，不得使用叠氮钠做为防腐剂。

1.  血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

2.  血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

3.  细胞培养物上清或其它生物标本：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

4.  组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。

注：标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。

5.  保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

操作安全须知：

1) 所有的化学试剂理应被认为具有潜在危害,任何的操作都必须提前做好实验防护。在操作试剂盒或处理样本的区域请不要饮食。

2) 推荐只有经过良好实验室培训的工作人员方可操作本试剂盒。操作时请佩戴合适的防护设施，例如白大衣、实验手套、安全眼镜等。

3) 请不要让试剂或样本接触皮肤、眼睛和粘膜等身体部位。如不慎接触，请立即用大量清水清洗。

4) 试剂盒中的终止液为酸性溶液，在使用终止液时，请佩戴防护服，做好防护眼睛、手及面部等的措施。

5)检测必须符合实验室管理规范的规定，严格防止交叉污染，所有样品、洗弃液和各种废弃物都应按照实验室规定进行处置，严禁随意丢弃。

6)试剂盒的液体组分中，含有防腐剂，可能引起皮肤过敏反应，避免吸入烟雾或与皮肤接触。底物液对皮肤、眼睛和上呼吸道有刺激作用，避免吸入烟雾。戴上防护手套，实验完成后彻底洗手。

仅供科研实验用，不做其他用途！