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罗丹明123的使用!
发布时间:2021-10-29   点击次数:193次

罗丹明123的使用!

丹明123 (Rhodamine 123、罗丹明123, Rh 123)是一种可以通过细胞膜的选择性染色活细胞线粒体的荧光染料,呈黄绿色荧光,多用于检测线粒体膜电位,也常用于细胞凋亡检测。它可以快速通过细胞膜,仅需几分钟就可以被具有活性的线粒体所俘获,并且对细胞没有任何毒性。Rhodamine 123还用于对许多种细胞进行染色,包括植物细胞和细菌,由于细胞内ATP的量与Rh123的荧光强度之间有相关性,因此Rh123也被用于检测细胞内的ATP。

溶解性:

溶于乙醇,参考浓度1mg/ml。

溶液的配制

用DMSO溶解,终浓度为1-5 mM。溶液分装,避光保存于-20 ºC。

罗丹明123使用方法

1. 用载玻片准备细胞。细胞数目应为 5×104~5×105个/mL。

2. 孵育该载玻片,用 PBS或Hank’s 液洗涤细胞。

3. 用培养基稀释 Rh123母液以制备 1~20µM Rh123缓冲液。具体工作浓度取决于细胞类型和细胞浓度。

4. 将 Rh123缓冲液加入载玻片并在37℃下孵育 30 分钟至 1 小时。

5. 去除 Rh123 缓冲液并用培养基洗涤细胞(洗涤细胞后为了固定,加入 10%福尔马林缓冲液并孵育 15~20 分钟,接着用 PBS洗涤)。

6. 用带有荧光素滤光片的荧光显微镜观察细胞。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。



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